Введение. Арабская порода лошадей является одной из самых древних в мире, обладает высокими рабочими качествами, а также особенностями конституции, которые позволяют ей переносить нагрузки с наименьшим риском развития патологий [1, 2].В настоящее время арабские лошади успешно выступают в конных дистанционных пробегах как в Российской Федерации, так и на международной арене. Имеются данные, что лошади арабской породы и ее помеси достигают лучших результатов в данной дисциплине [3]. Дистанционные пробеги являются популярным и активно развивающимся во многих странах видом спорта [4]. Поэтому изучение арабской породы остается актуальным на сегодняшний день.Данный вид спорта можно отнести к циклическим, поскольку лошадь совершает циклические движения для перемещения тела в пространстве [5]. Пробеги классифицируются по уровню соревнований, категориям участников, по длине дистанции и по возрасту лошадей. Соревнования по пробегам проводятся на дистанциях от 40 до 160 км [6].Таким образом, лошади подвергаются длительной аэробной нагрузке, сравнимой с марафонским бегом у человека.Физическая нагрузка изменяет работу организма с помощью нейрогуморальной регуляции. Срочная адаптация – структурно-функциональная перестройка, происходящая в организме непосредственно при выполнении физической работы, которая направлена на активацию сердечно-сосудистой системы, энергетических депо, поддержку гидратации тканей. Адаптация к анаэробной и аэробной нагрузке будет отличаться. При марафонском беге затраты энергии восполняются почти исключительно за счет аэробных процессов, анаэробные действуют только при стартовом разгоне, ускорении на дистанции и на финише. Основной источник энергии – углеводы и липиды. На длинных и сверхдлинных дистанциях способность поддерживать высокую скорость значительно зависит от производительности сердца и дыхательной системы. В то время как анаэробная нагрузка обеспечивается энергией за счет креатинфосфата и гликолиза [7, 8]. Поэтому будут отличаться гематологические и биохимические показатели крови при разном типе нагрузки.Изучение данной темы актуально, поскольку позволяет интерпретировать анализы крови спортивных лошадей и объективно оценивать реакцию на предъявляемую физическую нагрузку с целью дальнейшей ее корректировки или изменение рациона, добавление в него биологически активных добавок, пробиотиков или других компонентов, позволяющих нормализовать метаболизм и повысить работоспособность.Цель исследования – описать общий характер описать общий характер изменений гематологических и биохимических показателей крови арабских лошадей при срочной адаптации к длительной аэробной нагрузке.Задачи: изучить гематологические и биохимические показатели арабских лошадей в покое; гематологические и биохимические показатели крови арабских лошадей после длительной аэробной нагрузки; провести статистический анализ полученных данных; сформулировать выводы.Объекты и методы. Объектом исследования стали 10 клинически здоровых лошадей арабской породы (5 меринов и 5 кобыл) возрастом 6–10 лет. Лошади содержатся на одном конном заводе в Ленинградской области, получают одинаковый рацион, гуляют в левадах, проходят тренинг согласно возрасту, участвуют в соревнованиях по конным дистанционным пробегам. В период проведения исследования (апрель–июнь) лошади находились в начале соревновательного периода. Отбор проб в покое осуществлялся перед началом соревновательного периода в 6 утра до кормления, после длительной аэробной нагрузки – через 3 ч после финиша на соревнованиях по дистанционным пробегам. Лошади в соответствии с уровнем подготовки проходили дистанцию от 40 до 80 км со скоростью от 10 до 17 км/ч, средняя продолжительность нагрузки составляла 3 ч 18 мин. Взятие крови осуществлялось с учетом правил асептики и антисептики в пробирки с К3ЭДТА и с диоксидом кремния. Пробирки с диоксидом кремния центрифугировались в течение 20 мин, после отбора проб 10 мин при 3 500 об., сыворотку перемещали в сухую чистую пробирку типа Эппендорф и сразу замораживали. Транспортировка в лабораторию осуществлялась в замороженном виде. Пробирки на общий клинический анализ доставлялись в течение часа в лабораторию при температуре 20–24 °С. Биохимическое исследование проводили с использованием наборов «Абрис+», концентрацию тропонина I определяли хемилюминесцентным иммуноанализом на микрочастицах, сывороточного альфа-амилоида и гормонов – иммуноферментным анализом.Лейкограмму выводили путем микроскопии мазков крови (окраска по Паппенгейму), СОЭ измеряли с использованием пипеток Панченкова, концентрацию гемоглобина – гемоглобинцианидным методом с применением ацетонциангидрина, подсчет концентрации эритроцитов и лейкоцитов проводили с использованием счетной камеры с сеткой Горяева. Статистическая обработка полученных данных проводилась с использованием пакета программ в MS Excel, включала вычисление среднего арифметического, стандартного отклонения, расчет достоверности проводился с использованием критерия Манна–Уитни.Результаты и их обсуждение. Результаты исследования представлены в таблицах 1 и 2. Таблица 1Гематологические показатели крови арабских лошадейдо и после длительной аэробной нагрузкиHematological parameters of Arabian horses before and after prolonged aerobic exercise ПоказательРеферентныезначенияПокой(n=10)Нагрузка(n=10)Лейкоциты (г/л)7,00–12,0011,60±1,4514,47±2,251Эритроциты (г/л)7,10–10,509,00±0,908,00±0,55Гемоглобин (г/л)80,00–140,00114,17±13,59132,00±18,092Тромбоциты (г/л)100,00–600,00203,00±42,45162,50±36,43Миелоциты (%)0,000,000,00Миелоциты (г/л)0,000,000,00Юные нейтрофилы (%)0,000,000,00Юные нейтрофилы (г/л)0,000,000,00Палочкоядерные нейтрофилы (%)1,00–6,002,33±0,524,50±1,971Палочкоядерные нейтрофилы (г/л)0,05–0,600,27±0,060,65±0,281Сегментоядерные нейтрофилы (%)45,00–70,0056,00±3,2967,00±5,101Сегментоядерные нейтрофилы (г/л)2,25–7,006,51±1,059,76±2,141Эозинофилы (%)1,00–8,005,17±0,752,67±1,762Эозинофилы (г/л)0,05–0,800,62±0,100,38±0,282Базофилы (%)0–1,000,000,00Базофилы (г/л)0–0,100,000,00Моноциты (%)0–10,006,33±0,828,17±1,481Моноциты (г/л)0–1,000,73±0,101,17±0,211Лимфоциты (%)20,00–45,0030,17±3,6617,67±6,061Лимфоциты (г/л)1,00–4,503,49±0,512,50±0,812СОЭ (мм/ч)2,00–70,0032,50±17,5437,33±10,58Здесь и далее: 1Достоверно при р ≤ 0,01 по сравнению с покоем; 2Достоверно при р ≤ 0,05 по сравнению с покоем. Таблица 2Биохимические показатели крови арабских лошадейдо и после длительной аэробной нагрузкиBlood biochemistry of Arabian horses before and after prolonged aerobic exercise ПоказательРеферентные пределыПокой (n=10)Нагрузка (n=10)Общий белок, г/л62,00–78,0068,38±5,2967,72±4,84Альбумин, г/л25,00–45,0028,80±1,7729,93±1,51Глобулины, г/л34,00–46,0039,58±4,0637,78±4,23Альбумины, % 42,20±2,0344,33±3,01Глобулины, % 57,80±2,0355,67±3,01Мочевина, ммоль/л3,30–6,704,61±0,946,57±0,851Азот мочевины, ммоль/л1,50–3,102,15±0,443,06±0,401Креатинин, мкмоль/л62,00–167,00108,53±11,15100,33±19,90Билирубин, мкмоль/л5,60–39,0012,93±1,6418,33±7,15АЛТ, МЕ/л3,00–20,009,98±4,0815,47±5,172АСТ, МЕ/л50,00–420,00373,25±43,21394,45±101,02Щелочная фосфатаза, МЕ/л80,00–200,00150,66±20,09166,25±24,61Амилаза, МЕ/л10,00–100,0018,53±3,9720,33±6,04Глюкоза, ммоль/л4,20–6,405,03±0,465,07±0,73Холестерин, ммоль/л1,00–3,001,51±0,251,81±0,212Кальций, ммоль/л2,50–3,402,98±0,193,09±0,24Фосфор, ммоль/л0,70–1,401,07±0,210,96±0,21ЛДГ, МЕ/л200,00–600,00317,12±72,93388,18±139,37Креатинкиназа СК, МЕ/л20,00–220,00307,15±141,771204,33±114,751Креатинкиназа МВ, МЕ/л0,00–100,0058,38±22,9940,65±5,45Тропонин I, нг/мл0,00–0,200,0098±0,020,0688±0,031Сывороточный альфа-амилоид, мл/л0,00–10,0010,00±0,0010,50±1,23Кортизол, нмоль/л39,00–227,00148,15±69,85185,32±100,41Тестостерон, нмоль/л0,40–2,201,77±1,982,56±4,85Тестостерон (мерины), нмоль/л 0,61±0,080,74±0,141Тестостерон (кобылы), нмоль/л 1,23±0,540,52±0,091Индекс анаболизма, % 1,30±0,971,27±1,55Трийодтиронин общий, нмоль/л1,10–4,003,20±0,802,26±0,40Тироксин общий, нмоль/л20,00–57,0025,56±4,4933,78±10,831  Гематологические и биохимические показатели исследуемых лошадей находятся в пределах референтных значений, за исключением мышечной креатинфосфокиназы, что может быть вызвано нахождением лошадей в тренинге. Поскольку в покое мочевина находится в пределах референтных значений, можно утверждать, что лошади успевают восстановиться, а высокий уровень креатинфосфокиназы связан с ее медленной утилизацией организмом [9–14].После длительной аэробной нагрузки у арабских лошадей в относительных и абсолютных величинах достоверно выше (р ≤ 0,01) лейкоциты, палочкоядерные нейтрофилы, сегментоядерные нейтрофилы и моноциты. Лейкоциты увеличиваются на 25 % по сравнению с покоем, относительное количество палочкоядерных нейтрофилов – на 93, абсолютное количество палочкоядерных нейтрофилов – на 141, относительное количество сегментоядерные нейтрофилы – на 17, абсолютное количество сегментоядерных нейтрофилов – на 50, относительное количество моноцитов – на 29, абсолютное количество моноцитов – на 60 %. В свою очередь, наблюдается достоверное (р ≤ 0,01) снижение относительного количества лимфоцитов, а также достоверное (р ≤ 0,05) снижение абсолютного количества лимфоцитов, эозинофилов и относительного количества эозинофилов. По сравнению с покоем относительное количество лимфоцитов снижается на 42 %, абсолютное количество лимфоцитов – на 28, относительное количество эозинофилов – на 48, абсолютное количество эозинофилов – на 39 %. Таким образом, под влиянием длительной аэробной нагрузки развивается стрессовая лейкограмма, которая характеризуется повышением количества лейкоцитов, нейтрофилов, моноцитов и снижением эозинофилов и лимфоцитов. Повышение нейтрофилов, моноцитов и падение лимфоцитов у лошадей после нагрузки устанавливает С.С. Маркин с соавторами (2022), также количество моноцитов после работы повышается у лошадей в исследовании А.В. Андрийчука с соавторами, С.А. Зиновьевой с соавторами (2014) [15, 16]. А.А. Иванов с соавторами, Б.С. Селенов с соавторами в своих работах отмечают наиболее вероятной причиной развития стрессовой лейкограммы – влияние кортизола, который вызывает нейтрофилию, лимфопению, эозинопению. Предположительно нейтрофилия развивается вследствие мобилизации пристеночного пула под влиянием адреналина и снижения миграционных способностей нейтрофилов под влиянием кортикостероидов [17, 18].Количество циркулирующих лейкоцитов может увеличиваться под влиянием кортизола, а также при сокращении селезенки под влиянием симпатико-адреналовой оси, активированной физической нагрузкой [19].В своих работах проявление миогенного лейкоцитоза отмечают М.Е. Агафонова (2008), Е.Ю. Бородкина (2008), А.В. Андрийчук (2014), С.А. Зиновьева (2022) и другие авторы [15, 16, 19, 20].Также после нагрузки достоверно (р ≤ 0,05) повышается концентрация гемоглобина в крови. После нагрузки он повышается на 16 % по сравнению с покоем.Подобные изменения в своих исследованиях наблюдали М.Е. Агафонова (2008), Н.В. Черный (2017), Н.В. Иванова с соавторами(2014), С.С. Маркин с соавторами (2024) и другие ученые [19, 21–27]. Авторы связывают повышение концентрации гемоглобина с выходом эритроцитов из депо под влиянием физической нагрузки, однако в нашем исследовании рост количества эритроцитов не наблюдался, напротив, наблюдается снижение их количества, что может быть вызвано внутрисосудистым гемолизом, вызванным накоплением метаболитов в крови и ацидозом. Это также может приводить к повышению билирубина, которое мы наблюдаем после нагрузки [28].Достоверно (р ≤ 0,01) по сравнению с покоем повышается концентрация мочевины и азота мочевины в крови. После нагрузки их концентрация на 43 % выше, чем в покое. Мышечная работа усиливает катаболизм тканевых белков, в том числе кортизол усиливает распад белков в мышцах, что может повышать концентрацию мочевины [25].Увеличение концентрации после физической нагрузки у лошадей отмечают Н.Е. Орлова с соавторами (2018), С.С. Маркин с соавторами (2020), С.М.о. Тахир-заде (2014), [25, 29, 30].После нагрузки достоверно (р≤0,05) выше активность аланинаминотрансферазы, относительно покоя ее активность повышается на 55 %. Аланинаминотрансфераза – фермент, который присутствует в основном в клетках печени и почек. Во время физической нагрузки ускоряются многие биохимические реакции, особенно при аэробной работе усиливается распад липидов и углеводов, что увеличивает нагрузку на печень и повышает активность ферментов. Катаболизм белков с обезвреживанием потенциально опасных аминокислот также происходит при участии трансаминаз. Активность аланинаминотрансферазы достоверно выше при нагрузках, имеющих анаэробно-аэробный характер (острая нагрузка субмакисмальной мощности). В исследовании на беспородных крысах было установлено повышение активности аланинаминотрансферазы после острой физической нагрузки субмаксимальной мощности [31, 32].Повышение активности аланинаминотрансферазы после физической нагрузки у лошадей отмечали, В.С. Сергиенко с соавторами (2008), С.М.о. Тахир-заде (2014), С.А. Зиновьева с соавторами (2021) [20, 30, 31].Также достоверно повышается холестерин (р ≤ 0,05), по сравнению с нагрузкой его концентрация увеличилась на 20 %. Данные о закономерности изменения холестерина у спортсменов противоречивы. У спортсменов, занимающихся аэробными видами спорта, уровень холестерина намного ниже, чем у среднестатистического человека. При этом отмечают, что при более высоком содержании общего холестерина отмечается его снижение в ответ на мышечную нагрузку, при относительно низком, наоборот, происходит его увеличение. В исследовании на беспородных крысах острая физическая нагрузка (аэробная) вызвала повышение общего холестерина. Автор связывает данное явление с влиянием гипоксии [33, 34].Мышечная креатинфосфокиназа достоверно (р ≤ 0,05) повышается после нагрузки, ее активность выросла на 292 % по сравнению с покоем. Длительный ацидоз сопровождается повреждением мембран мышечных клеток и повышением активности фермента в крови. Многие авторы отмечают повышение активности фермента у лошадей после физических нагрузок разного характера [22, 30, 31, 35–38].В настоящее время механизм высвобождения сердечных тропонинов до конца не выяснен. Предложено 4 механизма повышения концентрации: высвобождение через неповрежденную мембрану кардиомиоцитов, повышение проницаемости мембраны; образование и выведение везикул; перекрестные реакции антител со скелетными изоформами [39].Короткие периоды гипоксии могут вызывать высвобождение cTnI без гибели клеток [40–43].Длительная аэробная нагрузка оказывает на сердце достаточное влияние, чтобы привести к достоверному (р ≤ 0,01) повышению сердечного тропонина I. После нагрузки его концентрация стала выше на 602 %. При этом активность сердечной кратинфосфокиназы после нагрузки ниже, чем в покое, что может быть связано с медленным высвобождением и выведением фермента, в то время как сердечные тропонины являются более чувствительным тестом.Повышение сердечных тропонинов I и T у лошадей после физической нагрузки (в том числе после длительной аэробной нагрузки) отмечают в своих работах многие зарубежные авторы – J. Giers et al. (2024), М. Flethøj (2016), М. Durando (2006), Nostell (2008), Т.М. Rossi (2021) и другие [36, 37, 40–45].Среди гормонов можно выделить тироксин и тестостерон. Длительная аэробная нагрузка вызвала достоверное (р ≤ 0,01) повышение концентрации тироксина, которая выросла на 32 % по сравнению с покоем. Также необходимо отметить, что тироксин и кортизол увеличивались после нагрузки у всех лошадей, кроме одной. Вероятно, между динамикой данных гормонов есть связь, поскольку кортизол ингибирует 5’-дейодиназу, которая отвечает за превращение тироксина в трийодтиронин. Таким образов, во время длительных нагрузок тироксин накапливается, а трийодтиронин продолжает расходоваться [49].В исследовании на крысах установлено повышение уровня трийодтиронина после нагрузки с его последующим снижением к 120-й мин после нагрузки, в то время как уровень тироксина увеличивался на протяжении всего времени [50].В исследованиях J. Giers et al. (2024) указано повышение тиреоидных гормонов после нагрузок разной интенсивности. Л.В. Рогожина (2022) сообщает о повышении трийодтиронина и незначимом изменении уровня тироксина после выездковой нагрузки у лошадей [27, 51].Отдельного внимания заслуживает тестостерон. У кобыл в покое он достоверно (р ≤ 0,01) выше, чем у меринов (в 2 раза). После нагрузки у меринов тестостерон достоверно (р ≤ 0,01) выше, чем у кобыл (в 1,4 раза). Противоположно у кобыл и меринов изменяется концентрация тестостерона под влиянием длительной аэробной нагрузки. У меринов после нагрузки его концентрация достоверно (р ≤ 0,01) выше по сравнению с покоем (на 21 %), в то время как у кобыл достоверно (р ≤ 0,01) ниже (на 58 %).Физическая нагрузка приводит к активации оси гипоталамус-гипофиз-кора надпочечников, что приводит к повышению уровня кортизола и андрогенов [52].Известно, что у хорошо тренированных мужчин после длительной нагрузки концентрация тестостерона увеличивается, однако данных по женщинам сравнительно мало [53].Также есть утверждение, что в состоянии перетренированности чувствительность клеток половых желез и коры надпочечников к активирующим влияниям снижается [52].С.А. Зиновьева с соавторами (2012), Е.Ю. Наумова с соавторами (2013) в своих работах установили повышение тестостерона и кортизола у жеребцов и кобыл в ответ на физическую нагрузку [54, 55].Заключение. Таким образом, установлено, что у лошадей арабской породы в ответ на длительную аэробную нагрузку достоверно повышается количество лейкоцитов, нейтрофилов, моноцитов и снижается количество эозинофилов и лимфоцитов, что характеризует развитие миогенного лейкоцитоза и стрессовой лейкограммы. Также в ответ на нагрузку достоверно увеличивается концентрация гемоглобина, общего холестерина, мочевины, азота мочевины, аланинаминотрансферазы, мышечной креатинфосфокиназы, сердечного тропонина I и тироксина. У кобыл в покое уровень тестостерона выше, чем у меринов, после нагрузки снижается и становится ниже, чем у меринов, в то время как у последних под нагрузкой его уровень повышается. Однако на данном этапе нет возможности установить, связана такая динамика с полом или с интенсивностью физической нагрузки.Таким образом, в настоящее время есть необходимость проводить дальнейшие исследования в данном направлении для установления причин подобной динамики биохимических показателей в ответ на длительную аэробную нагрузку.