Введение. При высоких концентрациях эссенциальные химические элементы – железо, цинк, марганец и другие – могут продуцировать токсические эффекты [1, 2]. Их воздействие на организм зависит не только от их концентрации, но и от структуры, растворимости, формы, способности образовывать окислительно-вительные комплексы [3, 4]. Основной причиной их токсического воздействия на организм являются нарушения внутриклеточных метаболических процессов. Среди этих нарушений можно выделить повреждение ДНК, перекисное окисление липидов, белков из-за повышенного окислительного стресса, повреждения митохондрий и апоптоза [5–7].Экспериментальные исследования на животных показали, что тяжелые металлы в повышенных концентрациях являются репродуктивными токсикантами [4, 8]. Они накапливаются в семенниках и их придатках, вследствие чего повреждаются эндокринная и репродуктивная системы [9]. Установлено, что различные повреждения, такие как снижение количества сперматозоидов, их подвижности, жизнеспособности, уровня тестостерона, активности антиоксидантных ферментов и сперматогенной функции, а также увеличение аномальной скорости сперматозоидов, перекисное окисление липидов и апоптоз, происходят в результате токсического воздействия тяжелых металлов на семенники [10, 11]. Кроме того, во многих исследованиях прямого воздействия тяжелых металлов пероральным, парентеральным или ингаляционным путем на лабораторных животных было продемонстрировано, что это негативно влияет на репродуктивную систему самцов [12, 13]. Необходимо проявлять особую осторожность при распространении результатов экспериментов с лабораторных на сельскохозяйственных животных из-за межвидовых различий в динамике развития эффектов и других видовых особенностей репродуктивной системы [14, 15].Степень проявления симптомов сильно зависит от способа, дозы, стадии, типа, продолжительности воздействия металлов на репродуктивную систему [16]. Гомеостаз микроэлементов также жизненно важен для развития тканей, которые могут быть разрушены точечным воздействием высоких доз тяжелых металлов [17]. Повышенная концентрация микроэлементов в семенной плазме может снизить плотность, подвижность и морфологию сперматозоидов [2, 18, 19].Цель исследования – рассчитать референтные содержания микроэлементов в семенниках бычков с учетом влияния паратипических факторов.Материал и методы. Для исследования были отобраны пробы семенников (m = 100 г) от бычков герефордской породы в  возрасте 16–18 месяцев, выращенных на территории Целинного района (n = 4) Алтайского края и Новосибирском (n = 6), Краснозерском (n = 4) и Маслянинском (n = 17) районах Новосибирской области. Животные содержались в типовых условиях промышленного комплекса с соблюдением зооветеринарных требований (ГОСТ 32855-2014, ГОСТ Р 52254-2004, ГОСТ 26090-84). По данным предубойного осмотра животные были клинически здоровы. Отбор образцов для анализа проводили сразу после забоя.Определение концентрации железа (Fe), марганца (Mn) и цинка (Zn) осуществляли методом атомно-абсорбционной спектрометрии с электротермической атомизацией на спектрометре МГА-1000.Статистический анализ выполнен в среде статистического программирования R. Для описания признаков использованы робастные статистики из-за малого количества наблюдений в группах: медиана (Me), минимальное и максимальное значение (Min, Max), первая и третья квартили (Q1, Q3) и интерквартильный размах (IQR). Гомогенность дисперсий оценивали с помощью теста Флигнера-Килина. Оценку влияния фактора проводили с помощью критерия Краскела-Уоллиса. Пост-хок анализ выполняли методом Данна с поправкой Холма. Расчет референтных интервалов проводили робастным методом с использованием бутстрэппинга для получения скорректированных и несмещенных интервалов [20].Результаты и их обсуждение. Данные по содержанию тяжелых микроэлементов в семенниках бычков герефордской породы в зависимости от района представлены в таблице 1. У скота из Маслянинского района концентрация цинка в семенниках была выше, а уровень железа и марганца ниже, чем у животных из других районов. У бычков из Маслянинского района уровень фенотипической изменчивости был значительно выше, чем у скота из других районов. Минимальная изменчивость концентрации химических элементов характерна для скота из Целинного района. В среднем фенотипическая изменчивость уровня цинка и марганца была ниже, чем железа. Таблица 1Содержание микроэлементов в семенниках бычков герефордской породы, мг/кг ПоказательРайонMeMinMaxQ1Q3IQRFeКраснозерский26,122,83223,630,16,49Маслянинский16,45,738,912,228,115,9Новосибирский28,525,234,225,330,24,88Целинный21,119,923,619,9233,07MnКраснозерский0,50,490,50,490,50,01Маслянинский0,350,21,730,31,140,84Новосибирский0,50,40,60,490,510,02Целинный0,50,50,510,50,510,01ZnКраснозерский12,911,513,711,813,61,74Маслянинский15,48,418,815,1160,94Новосибирский12,911,814,311,914,12,22Целинный11,911,212,111,412,10,61 Концентрация тяжелых металлов в семенниках крупного рогатого скота в настоящее время недостаточно изучена. Ранее нами на малой выборке были получены данные по концентрации кадмия, свинца и меди в семенниках бычков [21]. Однако в литературе не было найдено данных о содержании цинка, железа и марганца в семенниках крупного рогатого скота. Возможно, это связано с тем, что семенники быков очень ограниченно используются в пищу. Кроме того, нормативные документы не содержат данных о нормировании этих микроэлементов в субпродуктах.Одна из задач исследования – выявление влияния паратипических факторов на уровень химических элементов в семенниках. Несмотря на гомогенность дисперсий в группах по уровню цинка, оценку влияния эколого-географического фактора проводили с помощью критерия Краскела-Уоллиса (табл. 2), так как некоторые группы были малочисленными и характер распределения признака в них не соответствовал нормальному (p < 0,05). По результатам анализа видно, что уровень марганца не различался в изученных районах, напротив, очевидно, что концентрация цинка значительно зависит от паратипических факторов.  Таблица 2Оценка гомоскедастичности дисперсий ТМ в легких скота методом  Флигнера-Килина Показательdf*χ2p**HpЦинк35,420,1416,35< 0,001Железо38,710,037,860,05Марганец312,980,011,60,66* – хи-квадрат Флигнера-Килина; ** – статистика Краскела-Уоллиса.  Апостериорный анализ показал, что нет достаточных оснований отклонять нулевую гипотезу в отношении различий по уровню железа и марганца в семенниках скота, разводимого в изученных районах. Установлено, что концентрация цинка в семенниках бычков из Маслянинского района значительно выше, чем у животных из других районов (табл. 3). В свою очередь, уровень цинка в семенниках бычков из Краснозерского, Новосибирского и Целинного районов был схожим. Можно предположить, что данные различия обусловлены высокой фенотипической изменчивостью уровня цинка у животных из Маслянинского района. Необходимо продолжать мониторинг уровня цинка у скота на больших популяциях и выявить отдельные факторы, влияющие на его изменчивость.  Таблица 3Межгрупповое сравнение районов по содержанию цинка в семенниках бычков РайоныZ-статистикаpКраснозерский – Маслянинский2,520,024Краснозерский – Новосибирский0,170,43Маслянинский – Новосибирский2,710,017Краснозерский – Целинный0,520,6Маслянинский – Целинный3,170,005Новосибирский – Целинный0,740,69  Уровень марганца и железа значимо не различался у животных в изученных районах, поэтому их можно объединить в одну группу для расчета референтных интервалов. Полученные диапазоны с доверительными интервалами для нижней и верхней границ представлены в таблице 4. Таблица 4Референтные интервалы с 90 % доверительными интервалами (ДИ)для содержания тяжелых металлов в легких герефордского скота, мг/кг ПоказательРеферентный интервалНижний предел 90 % ДИВерхний предел 90 % ДИMn0–0,9590–0,1060,782–1,174Fe8,72–37,194,31–12,4734,31–41,27  Если сравнивать полученные референтные интервалы содержания железа и марганца, то очевидно, что их концентрации в семенниках значительно ниже. Так, в почках, печени, мышечной ткани и волосе концентрация железа и марганца в 2–8 раз выше, а в селезенке – более чем в 5–20 раз  [22]. Кроме того, при расчете референтных интервалов уровня химических элементов в органах и тканях животных необходимо учитывать влияние комплекса генетических и паратипических факторов [14, 23].Заключение. В ходе исследования установлено существенное влияние паратипических факторов на концентрацию цинка в семенниках герефордского скота. Уровень цинка в семенниках бычков из Маслянинского района на 16–23 % выше, чем в Новосибирском, Краснозерском и Целинном районах. Не выявлено различий между показателями содержания марганца и железа в семенниках животных в изученных районах. Наибольшая фенотипическая изменчивость концентрации микроэлементов в семенниках характерна для животных из Маслянинского района. Полученные референтные значения содержания марганца и железа в семенниках можно рассматривать в качестве физиологической нормы. В перспективе необходимо продолжить изучение содержания микроэлементов в органах и тканях крупного рогатого скота и разработать референтные значения для них.