Введение. Диагноз послеродовый метрит у молочных коров может быть поставлен в ранний период уже на 4–5-й день после отела и обычно определяется цитологическим путем с учетом количества нейтрофилов, когда доля гранулоцитов превышает 18 %. При ректальной пальпации или трансректальном ультразвуковом исследовании послеродовый метрит характеризуется растяжением матки, активно функционирующим желтым телом и закрытой шейкой матки. Однако важно помнить, что цервикальный канал не всегда бывает полностью закрыт, и в некоторых ситуациях возможно появление выделений во влагалищной полости. Сонографически, согласно публикациям P. Brodzki et al., 2015 [1], «…послеродовый метрит характеризуется активным желтым телом в яичнике, накоплением смешанных лохий в полости рогов матки». Исследования С.А. Макавчик с соавт., опубликованные в 2024 г. [2], показали, что «…для выбора успешной схемы лечения, а также для количественной оценки степени тяжести заболевания, в равной мере, как и для измерения чувствительности и специфичности клинических критериев, имеется мало данных о взаимообусловленности послеродовых, эхографических и цитологических изменений». Тем не менее ни одна из вышеперечисленных процедур не позволяет быстро определить диагноз. Кроме того, по данным V. Bronzo еt аl. [3]: «У части животных заметна задержка инволюции матки или шейки матки, что связано с более низким уровнем фертильности». Использование клинических записей, таких как случаи мертворождения, многоплодия, задержания последа, дистоции и гипокальциемии, действительно позволяет ветеринарным специалистам идентифицировать животных, находящихся в группе повышенного риска развития заболеваний матки, включая послеродовый метрит, однако важно отметить, что такие клинические данные хотя и информативны, но не представляют специфического диагноза.Многочисленные исследования (P. Abeysinghe et al. [4]; В.С. Болотова и др. [5]), проведенные в последние годы, показали, что уровень выработки провоспалительных и противовоспалительных цитокинов может предоставить ценную информацию о тяжести заболевания у высокопродуктивного молочного скота в послеродовой период. Это также касается перехода состояния на системный уровень и прогнозирования эффективности лечебных протоколов, что имеет немаловажное значение для дифференциальной диагностики инфекционных и иммунопатологических процессов сразу после родов. В данном случае, как утверждает С.А. Макавчик с соавт. [6], важную предиктивную способность осуществляют цитокины – интерлейкин-1 (Ил-1), интерлейкин-6 (Ил-6) и интерлейкин-10 (Ил-10). Согласно исследованиям N. Naim et al. [7], среди сигнальных белков особенно выделяются интерлейкины, чаще всего ИЛ-1α и ИЛ-1β. Экспрессия интерлейкинов происходит как в процессе нормальной беременности, так и при различных патологических состояниях репродуктивного тракта. Исследования C. Peker et al. [8], показывают, что главная биологическая функция интерлейкина-10 (Ил-10) заключается в снижении воспалительного ответа. Избыточный воспалительный иммунный ответ может наносить вред тканям, и именно поэтому Ил-10 был признан ключевым супрессором иммунного ответа и воспалительной активности.С.В. Шабунин с соавторами [9] подчеркивают, что в формировании иммунного ответа цитокины занимают первостепенное место, способствуя распознаванию антигенов, имеют схожую молекулярную массу и практически идентичный спектр биологической активности, наряду с этим они являются и конкурентами за связь с одними и теми же рецепторами основного комплекса гистосовместимости клеток иммунной системы. А В.И. Михалев и его соавторы особое внимание уделяют как способности цитокинов к активации перемещения нейтрофилов, эозинофилов и моноцитов, так и их участию в регуляции различных воспалительных реакций, включая восстановление тканей после воспалительных реакций [10]. Про- и противовоспалительные цитокины, в качестве медиаторов иммунного ответа, оказывают влияние на метаболические процессы в слизистых слоях матки и влагалища коров. Они также определяют темпы развития воспалительных и деструктивных изменений в этих органах [11]. При воспалительных заболеваниях репродуктивного тракта у скота после отела высокотехнологичные молочные предприятия гарантированно несут экономические и материальные убытки.Многочисленными отечественными (С.А. Макавчик и др.) [12] и зарубежными исследователями (R.A. Saxton еt аl.) [13] установлено, что основное влияние на маточный эпителий оказывает микробный фактор, приводящий к вторичным морфофункциональным модификациям. Данные модификации касаются циклической биотрансформации слизистого слоя матки, вследствие этого анализ содержания про- и противовоспалительных цитокинов в биоматериале коров с послеродовым метритом позволит разработать критерии для прогнозирования, дифференциальной диагностики, а также осуществления мониторинга за процессом лечения и вероятными исходами патологического состояния. Цитокины («цито» – клетка, «кинос» – движение) представляют собой широкую категорию интракринных, аутокринных, паракринных и эндокринных сигнальных агентов, которые регулируют врожденные и адаптивные иммунные реакции. Эти молекулы включают хемокины, интерфероны, интерлейкины, факторы некроза опухоли и лимфокины. Известны различные неиммунные действия цитокинов, и в этом обзоре будет освещена эмбриокиновая активность этих цитокинов [5, 12]. Введен термин «эмбриокин» для описания молекул, вырабатываемых клетками в репродуктивной системе матери или эмбрионом, которые регулируют развитие эмбриона. Современная классификация цитокинов учитывает их строение, функциональную активность, происхождение, тип цитокиновых рецепторов. Цитокины с учетом их биологической активности принято разделять на следующие группы: как регуляторы воспалительных реакций (провоспалительные и противовоспалительные цитокины) и иммунного ответа (клеточного и гуморального) и многие другие процессы, в которых участвуют цитокины [6]. В эти группы входят интерлейкины (ИЛ), интерфероны (ИФН), факторы некроза опухоли (ФНО), трансформирующие факторы роста (ТФР), миграционные ингибирующие факторы и более мелкие хемокины.Система цитокинов включает клетки-продуценты; растворимые цитокины и их антогонисты; клетки-мишени и их рецепторы. В последние годы описана популяция Тh 3, которая вырабатывает трансформирующий фактор роста β (ТФРβ) и супрессирует функцию как Тh 1, так и Тh 2. Семейство цитокинов IL-1 может оказывать провоспалительное или противовоспалительное действие, наиболее изученными при беременности коров являются IL-1a и IL-1β, которые экспрессируются при нормальной беременности и патологии [13]. Провоспалительные цитокины, в частности IL-1a, преобладают на этапе имплантации бластоцисты, что обусловлено локальной активацией медиаторов воспаления в ответ на ее внедрение. Первым в защитную реакцию организма при действии патогенных факторов включается IL-1β. Этот цитокин с широким спектром действия играет ключевую роль в развитии неспецифической защиты и специфического иммунитета. IL-1β инициирует и регулирует воспалительные и иммунные процессы, активирует нейтрофилы, Т- и В-лимфоциты, стимулирует синтез белков острой фазы и других цитокинов. Антогонистом IL-1β является IL-10, который продуцируется клетками Тh-2, IL-10, является противовоспалительным цитокином. Именно соотношение уровней этих цитокинов, а не их абсолютные значения, наиболее полно отражает направленность иммунной реакции и активность воспаления и может быть использовано в качестве критерия определения степени тяжести воспаления.Считается, что чем больше величина соотношения IL-1β / IL-10, тем более тяжелым является течение воспалительного процесса [14]. Интерлейкин-6 имеет прогностическую ценность при раннем воспалении, но многие ветеринарные врачи предпочитают сочетание клинической картины, анализа лейкоцитов, уровня СРБ и контроля температуры вместо дорогостоящего определения IL-6. Другим действием IL-6 является преимущественное стимулирование линии примитивных клеток эндодермы (PE) в бластоцистах IVP крупного рогатого скота. Количество PE-клеток постепенно снижается по мере старения бластоцисты in vitro с 8-го по 10-й день после оплодотворения, но добавление IL-6 увеличивает количество PE-клеток в течение этого периода времени. Неясно, улучшает ли IL-6 пролиферацию PE-клеток или ограничивает их апоптоз. Нельзя оставить без внимания и тот факт, что действие IL-6 на эмбрион зарегистрировано не только у крупного рогатого скота, но и у других биологических видов [10, 15]. Интерлейкин-8 представляет собой цитокин репродуктивной функции, который является медиатором развития фолликулов, овуляции и формирования желтого тела. Впервые был описан в качестве хемоаттрактанта для гранулоцитов, прежде всего нейтрофилов in vivo. Каждая клетка с TLR может продуцировать и секретировать IL-8, включая макрофаги и гладкомышечные клетки, тогда как эндотелиальные клетки накапливают IL-8 в везикулах [2]. IL-8 направляет и активирует нейтрофилы в направлении воспаления (хемотаксис), что проявляется в увеличении концентрации этого цитокина. Основная биологическая функция IL-10 заключается в уменьшении воспалительного ответа, поскольку чрезмерный иммунный ответ может приводить к повреждению тканей. IL-10 принимает участие в регуляции цитокинов и ингибирует избыточный синтез макрофагами и Т-хелперами 1-го типа провоспалительных цитокинов – IL-1β. IL-1a, IL-6, IL-8, IL-12 гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF), фактор некроза опухоли – альфа (ФНОa), интерферон гамма (ИНФg). Одновременно повышает активность Т-хелперов 2-го типа и их продукцию цитокинов, т. е. вызывает изменения иммунного ответа с клеточного на гуморальный. Также индуцируются процессы пролиферации и дифференцировки клеток в плазмоциты, что запускает продукцию антител. Еще IL-10 стимулирует выработку иммуноглобулинов E, участвующих в развитии аллергических реакций и антипаразитарной защите [15]. Побочным эффектом избыточного синтеза IL-10 и других противоспалительных цитокинов может быть развитие хронического воспаления и инфекций вследствие неспособности иммунных механизмов полностью подавлять воспаление. При сепсисе высокие концентрации IL-10 связаны с неблагоприятным исходом. Биологическое воздействие интерлейкина-10 на клетки врожденного иммунитета подавляет высвобождение иммунных медиаторов, экспрессию антигена и фагоцитоз [16]. Фактор некроза опухоли (TNF-a), кахексин, как многофункциональный провоспалительный цитокин, синтезирующийся в основном моноцитами и макрофагами. Получил свое название из-за способности ингибировать рост некоторых опухолей, кроме того, через свои рецепторы вызывает апоптоз, а также является одним из важных факторов защиты от внутриклеточных микроорганизмов, в т. ч. и вирусов. Фактор некроза опухоли (TNF-β), лимфотоксин, секретируют Т- и В-лимфоциты, подавляет выработку провоспалительных цитокинов, повреждает клетки, вызывая апоптоз. Цитокины оказывают влияние на многие биологические процессы: эмбриональное развитие, патогенез болезней, неспецифический и специфический иммунный ответ, изменения когнитивных функций, а также участвуют в эффективности вакцин. Следует отметить, что соотношение провоспалительных и противовоспалительных цитокинов во время беременности изменяется, а также они регулируют практически все этапы гестационного процесса: имплантацию бластоцисты, рост плаценты и плода, продукцию гормонов, апоптоз клеток, созревание шейки матки и механизмов родов. Таким образом, цитокины являются неспецифическими факторами, поэтому диагностика инфекционных, аутоиммунных болезней с помощью определения уровня цитокинов невозможна. Тем не менее изучение цитокинового профиля позволяет получить информацию о тяжести воспалительного процесса, его переходе на системный уровень и прогнозе, что важно при дифференциальной диагностике ряда инфекционных и иммунопатологических процессов.Цель исследований – изучить иммунологический статус у здоровых и больных послеродовым метритом коров в сыворотке крови и содержимом влагалища.Объекты и методы. Объектом исследований служили принадлежащие АО племзавод «Детскосельский» Ленинградской области лактирующие коровы голштинской породы в послеродовом периоде, массой 600–700 кг, 10 000–13 000 кг молочной продуктивности за 305 дней лактации. Ультразвуковые исследования проводились с использованием беспроводного ультразвукового сканера Easi-Scan: Go, который обеспечивает сканирование на глубинах 8; 12; 16 и 24 см при угле обзора 60°, а также аппарата ExoPad Mini, способного сканировать на глубине до 15 см и частоте до 10 МГц, с возможностью оцифровки объема и измерения толщины стенок рогов матки. В ходе ультразвукового обследования матки животных акцентировалось внимание на таких параметрах, как диаметр шейки матки и рогов, состояние их полостей, а также уровень эхогенности эндометрия и маточных рогов. Диспансеризации подлежало 140 лактирующих коров. В вакуумные пробирки Vacuette™ (Австрия) пробы крови брали утром до кормления из яремной вены. Для общего анализа крови был задействован гематологический анализатор Mindrey BC-2800 Vet (Китай). В исследовании [7] был выполнен НСТ-тест с использованием нитросинего тетразолия в крови. Относительное количество Т-лимфоцитов (%) оценивалось путем подсчета розеток, образованных лимфоцитами с эритроцитами барана при различных условиях инкубации, в то время как количество -лимфоцитов определялось на основании подсчета розеток с эритроцитами мыши. Абсолютное число Т- и В-лимфоцитов (кл/мм³) и коэффициент соотношения «индукторов-хелперов» к «киллерам-супрессорам» (%) вычислялись расчетным способом. Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) определялись методом, основанным на селективной преципитации антиген-антитело комплексов, с применением 3,75 %-го раствора полиэтиленгликоля М-6000 (ПЭГ), после чего проводилось фотометрическое измерение плотности преципитата при длине волны 450 нм.Для исследования отобрали 20 новотельных коров, которые в дальнейшем были разделены на две группы согласно принципу аналогов. В состав первой группы (n = 10) вошли клинически здоровые коровы, а в состав второй группы (n = 10) – коровы с послеродовым метритом. Образцы из влагалища и крови подвергались центрифугированию при 1000×g в течение 20 мин, после чего замораживались при –20 °C и хранились при –70 °C до анализа на наличие цитокинов. Были отобраны пробы крови и влагалищного содержимого для определения уровней цитокинов интерлейкин-4 (ИЛ-4), интерлейкин-8 (ИЛ-8), интерлейкин-2 (ИЛ-2) и интерферона бета (ИЛ-IFNb) с использованием наборов для ИФА китайской компании Cloud-Cone Corp. Для оценки результатов использовался фотометрический микропланшетный ридер, длина волны 450 нм (Multiscan FC, Thermo Scientific, США). Статистический анализ данных был произведен с использованием программы CurveExpert Basic.Для расчета чувствительности результатов среди коров использовалась следующая формула: Se = x / (x + y) · 100 %, где x обозначает количество больных коров. Специфичность отрицательных результатов среди коров с метритом рассчитывалась по формуле Sp = b / (b + z) · 100 %, где z – количество больных коров с положительным результатом в той же подгруппе. Полученная информация была систематизирована и обработана с помощью программы Statistica 6.0 (Statsoft Inc., США), а также программного обеспечения MS Excel и SPSS 10.0.5.Результаты и их обсуждение. Полевые исследования показали, что на высокотехнологических молочных предприятиях частота метрита составляла 53 % на 4–7-й день после родов. Послеродовый метрит наблюдается после оказания помощи при родах, а также в результате дистоции, задержания последа и апикального пролапса матки, а также после родильного пареза. Ректальная пальпация и эхография (рис. 1) анатомических структур матки у коров с послеродовыми метритами на 4–7-й день после отела выявляют значительное увеличение полости бывшего рога-плодовместилища, которая по сравнению с аналогичными показателями у здоровых животных в 2,34 раза больше.Анализ эхограмм (рис. 2), полученных от коров с послеродовым метритом, показал, что в роге-плодовместилище матки имеется выраженная полость, размеры которой в 1,9 раза (р < 0,01) превышают показатели, зафиксированные у клинически здоровых животных в тот же период исследования.   АБ Рис. 1. Эхографическая картина рога матки здоровой коровы (А), шейки матки здоровой коровы (Б) (сканер ExoPad Mini) Echographic picture of the uterine horn of a healthy cow (A), the cervix of a healthy cow (Б) (ExoPad Mini scanner)  Средняя толщина стенки матки у коров с диагнозом послеродовой метрит достигала (24,23 ± 0,32) мм, что свидетельствует об увеличении в 1,37 раза по сравнению с таковой у здоровых животных. Мышечный слой имеет увеличенную толщину, средний уровень эхогенности и однородную мелкозернистую структуру. Средняя толщина стенки шейки матки при наличии метрита составила (28,2 ± 0,6) мм, что является увеличением на 35,1 % (р < 0,01) по сравнению с показателями у здоровых коров аналогичного срока исследования. Разбор и интерпретация эхограмм, выполненных у коров с послеродовым метритом, показали: более чем в половине случаев состояние внутреннего слоя матки не соответствовало норме. Области повышенной эхогенности различной величины были отмечены в 49,2 % случаев. Гиперэхогенные изменения в базальном слое эндометрия, такие как очаги фиброза и кальциноза, фиксировались в среднем в 23,4 % случаев. Варикозное расширение вен параметрия было зарегистрировано в 50,5 % случаев. Также отмечался гипоэхогенный контур матки, как в изоляции, так и в сочетании с варикозным расширением вен параметрия, был отмечен в 60,8 % случаев; истончение эндометрия наблюдалось в 56,7 % случаев. Характеристика лимфоцитарного индекса представлена на рисунке 3.   АБ Рис. 2. Эхографическая картина шейки матки (А), рога матки (Б) больной послеродовым метритом коровы (диаметр рога, Easi-Scan: Go.)  Echographic picture of the cervix (A), horns of the uterus (Б) of a sick cow with postpartum metritis (horn diameter, Easi-Scan: Go.)   Рис. 3. Лимфоцитарный индекс у здоровых коров после отела и с осложнением послеродовым метритом Lymphocytic index in healthy cows after calvingand with postpartum metritis complication  Медианное содержание лейкоцитов составляет (7,32 ± 0,86) · 109/L. Установлено достоверное снижение количества Т-супрессоров на 30,9 % (р < 0,001) у больных коров с диагнозом послеродовый метрит. У больных метритом коров понизилось в три раза количество НСТ-клеток (р < 0,001) с одновременным снижением иммунореактивного индекса (ИРИ) (рис. 4). Снижение активности нейтрофилов, которые обычно участвуют в клеточной адаптации, указывает на аутоиммунный характер перестройки, возникающей на фоне гиперсинтеза эмбриотропных аутоантител в 54,4 % случаев. Данное наблюдение указывает не только на рост специфического иммунитета, но и на потенциальную активацию аутоантител посредством пролиферативных процессов в матке после родов. Такие изменения могут способствовать развитию воспалительных процессов и нарушению нормального заживления, что необходимо учитывать при диагностике и лечении послеродового метрита. У коров исследуемых групп в крови количество крупных ЦИК (С4) понизилось на 67,2 % (р < 0,001), средних (С3) – на 40,1 % (р < 0,01), тогда как мелких ЦИК, напротив, увеличилось на 52,4 % (р < 0,001) по сравнению с показателями больных послеродовым метритом животных.Очевидно, что функциональная дисфункция лимфоцитов шестого типа сыграла значительную роль в устойчивом сохранении внутриклеточных патогенов (рис. 5).    Рис. 4. Иммунореактивный индекс, НТС и ЦИК клеточных компонентов гомеостаза у здоровых коров и с осложнением послеродовым метритом Immunoreactive index, NTS, and CEC of cellular components of meostasis in healthy cows and with complications of postpartum metritis  В условиях, характерных для данной группы, наблюдается избыточная продукция эмбриотропных аутоантител в сочетании с ограниченной способностью организма к санации. Сопоставительная оценка клеток, обнаруженных во влагалищной слизи коров при цитологическом исследовании, представлена в таблице 1.  *   Рис. 5. Иммунологический индекс, экспоненциально прогнозирующий состояниерепродуктивной системы после отела The immunological index exponentially predicts the state of the reproductive system after calving Таблица 1Сопоставительная оценка клеточного состава больных и клинических здоровых коров (в поле зрения микроскопа), 109/лComparative assessment cellular structure sick and clinically healthy cows(in sight microscope), 109/l ПоказательНейтрофилы П Нейтрофилы С ЛимфоцитыМакрофагиПослеродовый метрит4,35±0,01**42,0+2,0***11,31+0,33***12,303±0,11**Клинически здоровые 1,0±0,01**8,0+1,410,1+0,013,0±0,01Здесь и далее: *р≤0,05; **р≤0,01; *** р≤0,001.  Такой сценарий развития аутоиммунных реакций действительно указывает на способность вредоносных факторов «выходить» за рамки контроля со стороны иммунной системы, что в свою очередь приводит к постоянной адаптационной неустойчивости в послеродовом периоде, связанной с инволюционными процессами в матке и яичниках. Данные наблюдения подтверждают концепцию мультифакторности в происхождении инфекционных или реактивных патологических процессов.В эндометрии у 67,8 % коров фиксировалось развитие аутоиммунной ситуации, когда становилось недостаточно энергии клеток для регенерации и ремоделирования матки после прошедшей беременности и завершившихся родов.Результаты определения уровней цитокинов, таких как Ил-4 и Ил-8, в сыворотке крови и в содержимом влагалища больных послеродовым метритом и здоровых коров отражены в таблице 2.Концентрация интерлейкина IL-8 составила (40,37 ± 0,08) пг/мл в влагалищном содержимом и (29,92 ± 0,05) пг/мл в сыворотке крови коров с послеродовым метритом (р < 0,05). Значения превышают показатели у здоровых животных в 1,3 раза.Уровень экспрессии IL-4 в сыворотке крови здоровых животных оказался в 1,2 раза ниже, чем у больных коров. Во влагалищном содержимом уровень экспрессии интерлейкина-4 у здоровых особей оказался в 1,39 раза меньше, чем у коров с послеродовым метритом. Полученные нами данные подтверждают выводы, сделанные в работе В.С. Болотовой и др. (2023) [5], в которой было установлено, что экспрессия цитокина IL-8 в сыворотке крови клинически здоровых животных была ниже в 1,92 раза (p < 0,05) по сравнению с больными животными. Аналогично при исследовании сыворотки крови коров было замечено, что уровень цитокинов IL-4 у клинически здоровых животных также ниже, чем у животных с послеродовым метритом.   Таблица 2  Концентрация Ил-4 и Ил-8 в сыворотке крови и содержимом влагалища клинически здоровых и больных коров, пг/млConcentration of Il-4 and Il-8 in blood serum and vaginal contents of clinically healthy and sick cows, pg/ml ПоказательГруппа животныхклинически здоровых коров ( n = 10) (контрольная)больные послеродовымметритом коровы( n = 10) (подопытная)Сыворотка крови: Ил-8Ил-4 26,22 ± 0, 21 138,20 ± 0,40  48,32 ± 0,05 пг/мл**166,83 ± 0,13 пг/мл**Содержимое влагалища:Ил-8Ил-4 29,92 ± 0,05 117,13 ± 0,11  40,37 ± 0,08 пг/мл**151,55 ± 0,09 пг/мл***  В исследованных цитограммах коров с послеродовым метритом содержалось большое количество клеток базального и парабазального ряда, что является признаком активации процессов регенерации эпителия. В некоторых образцах также встречались безъядерные чешуйчатые клетки, что свидетельствует о десквамации клеток. Во многих цитопрепаратах была выявлена умеренно выраженная вакуолизация цитоплазмы клеток и лейкоцитарная инфильтрация (рис. 6), что указывает на метаболические изменения или на воспалительную реакцию.                                                  1                                                                                    2 Рис. 6. Цитограмма мазка-отпечатка на 4–7-й день после отела с наружного устьяшейки матки (1) и влагалища (2) у коров с послеродовым метритом Cytogram of a smear print on the 4th–7th day after calving from the external mouth of the cervix (1) and vagina (2) in cows with postpartum metritis Данные, полученные в ходе нашего исследования, согласуются с результатами работ S. Makavchik et al. (2019) и R.A. Saxton et al. (2021) [13, 14], что подтверждает значимость цитокинов как маркеров состояния иммунной системы и их потенциальную роль в патогенезе послеродовых заболеваний. Заключение. У больных животных было выявлено снижение числа Т-супрессоров на 30,9 %. Анализ результатов НСТ-теста у коров с метритом выявил трехкратное сокращение числа НСТ-клеток, что сопровождалось уменьшением иммунореактивного индекса (ИРИ). Супрессия лейкоцитов происходит за счет снижения их кислородзависимой активности, что подтверждается полученными результатами спонтанного НСТ-теста, поскольку неактивированные фагоциты менее подготовлены к уничтожению бактерий даже при наличии антигенной стимуляции. Более того, у представителей данной группы животных чаще регистрировались случаи послеродового метрита, провоцируемого остатками плаценты в полости матки. Количество крупных (С4) циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) у больных коров с послеродовым метритом понизилось на 67,2 %, средних (С3) – на 40,1 %, а мелких ЦИК, напротив, увеличилось на 52,4 %. Установлен анизоцитоз за счет макроцитов (+), пойкилоцитоз за счет эхиноцитов (+) и единичных акантоцитов, в то время как метарубрицитов – 4 %. При изучении морфологии лейкоцитов определили гиперсегментацию нейтрофилов (+) и токсические изменения за счет пенистости цитоплазмы. В ранний послеродовой период развитие метрита у коров сопровождается дисбалансом между провоспалительными и противовоспалительными цитокинами. В свою очередь, воспалительный процесс, местная сосудистая реакция, необходимая для регенерации тканей, сопровождается избыточной секрецией противовоспалительных цитокинов как естественного механизма защиты организма в ответ на повреждение чужеродного агента. Иммуноферментный анализ (ИФА) представляет собой чувствительный анализ, в котором используются первичные и вторичные антитела, специфичные к интересующим белкам, включая цитокины [10], который позволяет измерить концентрацию высвобождаемых цитокинов. По данным исследований [11], большинство цитокинов обычно присутствуют на низких уровнях (пикограмм/мл) в сыворотке или плазме in vivo и имеют диапазон активности от низких пг/мл до нг/мл, поэтому эти анализы должны быть достаточно чувствительными для количественного определения этих низких уровней. Уровни цитокинов, измеренные иммуноферментным методом, могут быть неинформативными из-за присутствия растворимых рецепторов для цитокинов. В этих случаях специфическое взаимодействие цитокина с рецептором ведет к кажущемуся исчезновению его из крови. Циркулирующие аутоантитела к цитокинам являются ингибиоторами, которые присутствуют в сыворотке животных, получавших цитокиновую терапию [12, 17]. Определение экспрессии генов цитокинов в клетках по накоплению мРНК – еще один подход к оценке их синтеза. Измеряются мРНК цитокинов на молекулярном уровне, когда необходимый продукт (мРНК) искусственно амплифицируется после преобразования в копию ДНК (кДНК). Хотя метод имеет ряд преимуществ, таких как его количественная особенность и отсутствие необходимости в специфических антителах, он не дает информации о реальных концентрациях цитокинов, которые вырабатываются и высвобождаются во внеклеточную среду. Показано, что для некоторых цитокинов уровни мРНК не связаны напрямую с уровнями активных цитокинов. Например, фактор некроза опухоли альфа (TNF-α) сначала вырабатывается в неактивной форме в виде трансмембранного белка и только после расщепления он высвобождается во внеклеточную среду в своей биологически активной форме.Таким образом, измерение уровня цитокинов в биологических жидкостях позволяет оценить их уровень в норме и при патологии. Для получения более полной информации о содержании цитокинов в тканях необходимо использовать комбинацию методов, позволяющих оценить как экспрессию мРНК, так и синтез данного цитокина в клетке.