Россия
В статье представлена дифференциальная диагностика туляремии от бруцеллеза у больно- го жеребца, содержащегося в одной из частных конюшен Омской области. На территории част- ной конюшни на протяжении двух месяцев (июль, август) была зафиксирована массовая гибель диких грызунов (мелкие мышевидные грызуны, дикие хомяки, суслики), а впоследствии – кошек. Ведущими клиническими симптомами у жеребца были кахексия при нормально сохраненном аппе- тите, артрит путовых суставов тазовых конечностей и субфебрильная температура тела. Для лабораторной серологической диагностики был использован комплекс реакций, а именно: РА по Райту, РСК, РБП, РНГА. Титры антител у жеребца к возбудителю туляремии в РНГА соста- вили 1:320, что являлось диагностически значимым показателем. Также был использован высо- кочувствительный метод ПЦР, который позволил провести дифференциальную диагностику и исключить бруцеллез. Дополнительные серологические исследования (РНГА) дали отрицатель- ные реакции на иерсиниоз (серовары 03 и 09). При вынужденном убое были выявлены патологиче- ские изменения в отдельных органах. Печень увеличена, на поверхности имелись множественные мелкие серовато-желтые очаги, соскоб на разрезе был обильным. Селезенка сильно увеличена в размерах, на ее поверхности имелись мелкопятнистые кровоизлияния, консистенция органа была тестоватой, края закруглены. На разрезе пульпа темно-вишневого цвета, при этом соскоб обильный. Мезентериальные лимфатические узлы также увеличены, отечны, с участками кро- воизлияний и некроза. На серозной оболочке тонкого кишечника и брыжейке наблюдали точечные кровоизлияния. Описанный клинический случай подтверждает необходимость проведения тща- тельной дифференциальной диагностики туляремии лошадей с целью исключения других инфек- ций (бруцеллеза, иерсиниоза) с использованием высокочувствительных методов лабораторной диагностики.
лошади, бруцеллез, туляремия, гематология, серология, ПЦР-диагностика.
Введение. Породистых лошадей всегда счита- ли национальным достоянием, которое старались приумножить. Чистокровная верховая порода ло- шадей является наиболее престижной и дорого- стоящей на территории Российской Федерации. Стоимость некоторых представителей породы может достигать десятков миллионов рублей. Со- ответственно, экономические убытки, возникаю- щие в результате падежа или вынужденного убоя племенных животных, могут нанести непоправи- мый ущерб племенным хозяйствам, особенно не- большим формам собственности.
В последние годы на территории трех фе- деральных округов Российской Федерации (Се- веро-Западного, Сибирского и Центрального) регистрируется активизация природных очагов ту- ляремии. Рост заболеваемости животных наблю- дается в годы повышения численности грызунов. Туляремия – природно-очаговая зооантропо- нозная инфекция, характеризующаяся поражени- ем диких грызунов и членистоногих, а также птиц и млекопитающих, в том числе лошадей и человека [1, 2]. Заболевание характеризуется лихорадкой, интоксикацией, лимфаденитами и хроническим течением [3–7]. В настоящее время возбудитель
заболевания Francisella tularensis относится к се- мейству Francisellaceae, роду Francisella. Возбуди- тель в своем составе содержит соматический (О) и оболочечный (Vi) антигены, он также обладает антигенным сродством с бруцеллами и возбуди- телем иерсиниоза, что необходимо учитывать при проведении лабораторной диагностики. Ос- новным фактором патогенности является эндо- токсин. Возбудитель туляремии высоко устойчив в условиях окружающей среды, особенно при низких температурах и высокой влажности, но подвержен высыханию [8].
Эпизоотологические данные. Основным источником и резервуаром возбудителя инфек- ции являются грызуны, которые переболевают туляремией в тяжелой септической форме, не- редко с летальным исходом. Выделение воз- будителя происходит с секретами и экскретами больных животных, а также огромное количе- ство Fr. tularensis содержат трупы. Для данной инфекции характерна природная очаговость [4, 9, 10]. Персистенция возбудителя в природных очагах поддерживается также кровососущими насекомыми. Известно несколько путей пере- дачи возбудителя, а именно трансмиссивный,
алиментарный, контактный и аспирационный [9]. По данным ряда авторов, возможно внутриу- тробное заражение. Чаще всего наблюдаются спорадические случаи или регистрируют отдель- ные локальные вспышки. Для лошадей особое значение имеет трансмиссивный путь передачи инфекции. Лошади также могут заражаться али- ментарным путем через инфицированные корма и воду [11].
Патогенез. Развитие инфекционного про- цесса происходит после внедрения возбудителя через поврежденные кожу и слизистые оболочки глаз, дыхательной и пищеварительной систем. В месте проникновения возбудитель начинает раз- множаться, вызывая воспалительный процесс с последующим нарушением слизистых оболо- чек. С током крови и лимфы микроорганизмы проникают в регионарные лимфатические узлы, оседают там и вызывают развитие специфиче- ского лимфаденита [12]. Разрушение микробов в лимфатических узлах и в крови приводит к высвобождению эндотоксина, клинически это проявляется интоксикацией и развитием местно- го воспалительного процесса.
Клиническое проявление туляремии у лоша- дей не однотипно: наблюдают острое течение болезни в виде абортов или атипичное, бессим- птомное. Кобылы абортируют на 4–5-м меся- це жеребости, после аборта у них не отмечено повышения температуры тела и осложнений. Развитие болезни обусловлено вирулентностью возбудителя, дозой заражения и местом его про- никновения в организм восприимчивого живот- ного [2].
Патолого-анатомические изменения у лоша- дей изучены недостаточно. В легких, селезенке, печени выявляют желтовато-серые узелки, ха- рактерные для септицемии [2].
Диагностика заболевания базируется на анализе клинических признаков, эпизоотоло- гических данных и результатов лабораторных исследований. В последнее время существен- ную роль приобретают серологические методы исследования, среди которых используются ре- акция агглютинации (РА) и реакция непрямой гемагглютинации (РНГА), с обязательным уче- том титра антител. Так, диагностические титры антител от 1:10–1:320, а у сельскохозяйствен- ных животных они могут достигать 1:320–1:640, нередко бывают низкими. Это зависит от формы переболевания, вирулентности возбудителя и уровня иммунитета. Необходимо учитывать воз- можность перекрестных реакций с бруцеллами и возбудителями иерсиниоза. Чаще при серологи- ческой диагностике применяют обе реакции (РА и РНГА). Использование ПЦР позволяет обнару- жить специфическую ДНК возбудителя.
Лечение. Этиотропная терапия проводится антибиотиками аминогликозидами (стрептоми- цин или гентамицин) или тетрациклинами (док- сициклин, рифампицин) [2].
Профилактические мероприятия включают контроль за природными очагами туляремии, а именно обнаружение эпизоотий среди диких животных, проведение дератизационных и де- зинсекционных мероприятий. Биопрепараты для специфической профилактики туляремии у жи- вотных не разработаны [5].
Цель исследования. Изучить проявление туляремии у жеребца чистокровной верховой по- роды на территории Омской области.
Материал и методы исследования. Мате- риалом для исследования являлись пробы кро- ви, мочи, кала, смывы из прямой кишки, получен- ные от жеребца.
Клиническое обследование животного вклю- чало сбор прижизненного анамнеза, осмотр, определение температуры тела, цвета видимых слизистых оболочек.
Гематологические исследования проводили согласно общепринятым в ветеринарной прак- тике методам, при этом определяли количество эритроцитов, лейкоцитов, а также осуществляли подсчет лейкограммы и определение СОЭ [13]. Биохимические показатели крови определяли на цифровом биохимическом анализаторе Stat Fax 3300. Серологическое и ПЦР-исследования на бруцеллез, серологические исследования на ту- ляремию, иерсиниозы проводили на базе ФБУН
«Омский НИИ природно-очаговых инфекций» Роспотребнадзора. ПЦР-диагностику осущест- вляли с использованием набора реагентов для обнаружения ДНК возбудителя инфекционных заболеваний методом ПЦР (GenePaK® DNA PCR test). Патолого-анатомическое вскрытие проводили согласно общепринятым методикам.
Результаты исследования и их обсужде- ние
Анамнез жизни и болезни. Заболевание было зарегистрировано в одном из коневодче- ских хозяйств Омской области. Жеребец чисто- кровной верховой породы 1999 г. рождения на период болезни содержался в данном хозяйстве в период 2012–2016 гг. в качестве жеребца-про- изводителя и при этом за пределы хозяйства не вывозился.
При анализе эпизоотологической ситуации была установлена массовая гибель диких грызу- нов (мелкие мышевидные грызуны, дикие хомя- ки, суслики), трупы которых обнаруживались на протяжении июля-августа на территории частной конюшни, а впоследствии и гибель всех кошек, живших при конюшне.
У жеребца проявилась хромота 4/5 степени на левую тазовую конечность, при осмотре был обна-
ружен диффузный отек в области путового сустава левой тазовой конечности, горячий и болезненный при пальпации. Ректальная температура животно- го составляла 39 °С, пульс – 42 уд/мин, дыхание – 12 дд/мин. Проведение диагностической пункции путового сустава выявило скопление большого ко- личества синовиальной жидкости водянистой кон- систенции от бледно-желтого до прозрачного цве- та. Внутрисуставная диагностическая анестезия путового сустава дала положительный результат. После чего было назначено медикаментозное ле- чение острого асептического артрита путового су- става. Лечение дало положительный результат, и уже через два дня наблюдалось улучшение общего состояния, снижение степени хромоты до 1/5.
На фоне выздоровления через неделю проя- вился рецидив, вновь появились признаки артрита на обоих путовых суставах тазовых конечностей и перемежающаяся хромота преимущественно опор- ного типа на тазовые конечности. Была продолже- на схема лечения, которая дала положительные результаты – снизилась степень хромоты.
Результаты проведенных гематологических исследований свидетельствуют о лейкоцитозе с преобладанием гранулоцитов, лимфоцитопе- нии, снижении палочкоядерных форм, увеличе- нии количества сегментоядерных нейтрофилов. Также было установлено снижение СОЭ. После проведенного лечения показатели АЛАТ, обще- го билирубина были выше нормы, а кальция и натрия не соответствовали физиологическим показателям. Через месяц после лечения была проведена профилактическая дегельминтизация препаратом «Альвет» в дозе 3,75 г/100 кг, а за- тем через неделю проведен повторный курс ан- тибиотикотерапии с использованием комплекс- ного антибактериального препарата Пен-Стреп (Norbrook), 1 мл которого содержит 200000 МЕ бензилпенициллин-прокаина и 200 мг дигидро- стрептомицин сульфата. Схема лечения включа- ла применение препарата в дозе 20 мл внутри- мышечно один раз в сутки в течение 5 дней.
В соответствии с планом противоэпизоотиче- ских мероприятий при проведении лабораторных исследований у жеребца была установлена поло- жительная реакция на бруцеллез в РА по Райту в разведении 1:100 МЕ (2 креста), тогда как в РСК и РБП был получен отрицательный результат.
При исследовании проб мочи, кала, смывов из прямой кишки микроскопическим и бактерио- логическим методами на иерсиниоз был получен отрицательный результат, что позволило исклю- чить данную инфекцию.
Для осуществления дифференциальной ди- агностики было проведено повторное иссле- дование крови на бруцеллез с использованием серологического и ПЦР-исследования, сероло- гического метода на туляремию и иерсиниозы в
ФБУН «Омский НИИ природно-очаговых инфек- ций» Роспотребнадзора.
В результате дополнительных исследований была получена отрицательная реакция (РНГА) на иерсиниоз (серовары 03 и 09), получена от- рицательная реакция на бруцеллез (ПЦР, РСК). При исследовании сыворотки крови с исполь- зованием РНГА были определены антитела к возбудителю туляремии, при этом титр антител составил 1:320.
Патолого-анатомические изменения. В со- ответствии с пп. 3.2 и 12.3 Ветеринарных правил ВП-13.3.130296 был произведен убой животного на санитарной бойне. При этом в отдельных ор- ганах были выявлены патологические изменения. Печень увеличена, на поверхности – множествен- ные мелкие серовато-желтые очаги, соскоб на разрезе обильный. Селезенка резко увеличена в размерах, на поверхности имеются мелкопятни- стые кровоизлияния, консистенция органа тесто- ватая, края закруглены. На разрезе пульпа тем- но-вишневого цвета, при этом соскоб обильный. Мезентериальные лимфатические узлы увеличе- ны, отечны, с участками кровоизлияний и некроза. На серозной оболочке тонкого кишечника и бры- жейке точечные кровоизлияния. Продукты убоя были направлены на утилизацию.
Выводы
-
Заражение жеребца туляремией предпо- ложительно наступило алиментарным путем при поедании кормов, контаминированных экскрета- ми грызунов бактерионосителей.
-
У жеребца наблюдалось латентное тече- ние болезни, при этом ведущими клиническими симптомами были: кахексия при нормально со- храненном аппетите, артрит путовых суставов тазовых конечностей и субфебрильная темпера- тура тела.
-
Патолого-анатомические изменения при туляремии у лошади соответствовали алимен- тарному пути заражения.
-
Применение серологического исследования (РНГА) позволило установить диагностические ти- тры антител на туляремию у лошади (1:320).
1. Кудрявцева Т.Ю., Попов В.П. [и др.]. Эпидеми- ологический и эпизоотологический анализ си- туации по туляремии в Российской Федерации в 2016 г., прогноз на 2017 г. // Проблемы особо опасных инфекций. 2017. № 2. С. 13–18.
2. Юров К.П., Заблоцкий В.Т., Косминков Н.Е. Инфекционные и паразитарные болезни ло- шадей. М.: Зоомедлит, 2010. С. 142–145.
3. Гусева Е.Д., Дудникова Н.С. Туляремия. Влади- мир: Изд-во ОКНИИ и MC ВНИИЗЖ, 2001. 40 с.
4. Олсуфьев Н.Г., Дунаева Т.Н. Природная очаговость, эпидемиология и профилактика туляремии. М.: Медицина, 1970. 271 с.
5. Олсуфьев Н.Г. Таксономия, микробиология и лабораторная диагностика возбудителя ту- ляремии. М.: Медицина, 1975. 192 с.
6. Ellis J. Tularemia / J. Ellis, C.F. Oyston, M. Green, R.W. Titball II Clin. Microbiol. Rev. 2002. Vol. 25. P. 631–646.
7. Petersen J.M. Laboratory analysis of tularemia in wild-trapped, commercially traded prairie dogs, Texas, 2002 / J.M. Petersen, M.E. Schrief- er, L.Carter [et al.] // Emerg. Infect. Dis. 2004. Vol. 10, N. 3. P. 419–425.
8. Abd H., Johansson T., Golovliov I. et al. Surviv- al and growth of F.tularensis in Acanthamoeba castellanii // Appl. Environ. Microbiol. 2003. V. 69, № 1. P. 600–606.
9. Селезнева А.А. Гидробиологический фактор в распространении туляремии // Тр. Томск. ГУ. Сер. Биология. 1953. Т. 125. С. 255–260.
10. Селезнева А.А. Роль ручейников, мол- люсков и лягушек в длительности заражения Bacterium tularense проточных водоемов // Вопросы краевой патологии, фитонцидов и производства бакпрепаратов. Томск: Поли- графиздат, 1953. С. 94–96.
11. Зуевский А.П., Панова Н.С. Об инфицированно- сти грунтовых вод возбудителем туляремии // Актуальные проблемы профилактики туляре- мии: тез. докл. всесоюз. конф. (15–17 октября 1991 г., г. Симферополь). М., 1991. С. 70–71.
12. Вершинин Н.М., Миронч Ю.В., Мизитова Л.A. [и др.]. К экологии F. tularensis в степном очаге тулярек Юго-Восточного Забайкалья // Акту- альные проблемы профилактики туляремии: тез. докл. всесоюз. конф. (15–17 октября 1991 г., г. Симферополь). М., 1991. С. 32–33.
13. Кондрахин И.П., Курилов Н.В., Малахов А.Г. [и др.]. Клиническая лабораторная диагно- стика в ветеринарии: справ. изд. М.: Агро- промиздат, 1985. 287 с.
