сотрудник с 01.01.1992 по 01.01.2025
Москва, Россия
сотрудник с 01.01.1996 по 01.01.2025
ВНИИ пищевой биотехнологии (заведующая лабораторией)
с 01.01.2003 по 01.01.2025
Москва, Россия
с 01.01.1996 по 01.01.2025
ВАК 1.5 Биологические
ВАК 4.1.1 Общее земледелие и растениеводство
ВАК 4.1.2 Селекция, семеноводство и биотехнология растений
ВАК 4.1.3 Агрохимия, агропочвоведение
ВАК 4.1.4 Садоводство, овощеводство, виноградарство и лекарственные культуры
ВАК 4.1.5 Мелиорация, водное хозяйство и агрофизика
ВАК 4.2.1 Патология животных, морфология, физиология, фармакология и токсикология
ВАК 4.2.2 Санитария, гигиена, экология, ветеринарно-санитарная экспертиза и биобезопасность
ВАК 4.2.3 Инфекционные болезни и иммунология животных
ВАК 4.2.4 Частная зоотехния, кормление, технологии приготовления кормов и производства продукции животноводства
ВАК 4.2.5 Разведение, селекция, генетика и биотехнология животных
ВАК 4.3.3 Пищевые системы
ВАК 4.3.5 Биотехнология продуктов питания и биологически активных веществ
УДК 663.12 Дрожжи
Цель исследования – изучение совместимости микроэлементов для возможности сочетанного обогащения дрожжей железом и медью. Объекты исследования – штамм хлебопекарных дрожжей из коллекции микроорганизмов ВНИИ пищевой биотехнологии лаборатории биотехнологии пекарных дрожжей и соли железа, меди и марганца – источники микроэлементов. Дрожжи культивировали на микробиологической качалке при скорости вращения 220 об/мин в колбах Эрленмейера объемом 750 см3 с 75,0 см3 стандартной среды с содержанием сухих веществ 8 % в течение 18 ч при температуре 30 °С. Количественное содержание азотистых веществ в дрожжевой биомассе определяли методом Кьельдаля согласно ГОСТ 13496.4-2019. Накопление биомассы исследовали методом весового контроля после культивирования, разделяя центрифугированием твердую и жидкую фракции. Разделение биомассы на твердую и жидкую фракции проводили на лабораторной центрифуге ОПМ-16 в течение 12 мин со скоростью вращения 8000 об/мин. Микроэлементный состав (железо и медь) определяли методом атомно-абсорбционной спектрометрии с электротермической атомизацией на приборе «КВАНТ-Z.ЭТА». Проведены сравнительные исследования способов фортификации отобранного штамма S. cerevisiae Y-581 с, подтвердившие практическую возможность сочетанного обогащения дрожжей железом и медью: 1 – при культивировании дрожжей; 2 – ферментолизатов инактивированных клеток, с получением обогащенной продукции с различными функционально-технологическими свойствами и целевыми направлениями их применения. Установлены рациональные дозировки внесения микроэлементов в питательные среды для культивирования отобранного штамма (50 мг железа, 2,5 мг меди и 5,0 мг марганца на 100 см3), позволяющие достичь процент встраивания железа (90,7 %) и меди (72,5 %) и повышения уровня синтеза белка на 15,5 %. Выявлена положительная динамика повышения степени обогащения микроэлементами при фортификации ферментолизатов инактивированных дрожжей и установлены рациональные условия, обеспечивающие наибольший уровень содержания микроэлементов (Fe + Cu) в целевой продукции. Результаты фракционного состава ферментолизата дрожжей подтвердили существенное повышение содержания в биодоступной форме свободных аминокислот, низкомолекулярных пептидов и растворимых углеводов. Разработана принципиальная блок-схема по получению ферментолизата дрожжевого с железом и медью.
обогащение, микроэлементы, совместимость, ингредиент, лиганд, ферментолизат
Введение. В настоящее время железодефицитная анемия (ЖДА) – самое распространенное заболевание в мире среди женского населения. По данным Всемирной организации здравоохранения, более 2,5 млрд человек имеют скрытый дефицит железа. В Российской Федерации около 50 % населения испытывают недостаток железа, а также меди [1–4]. Это связано с негативной экологической ситуацией, сложившейся в ряде российских регионов, нервными перегрузками и влечет за собой нарушения системы питания, гормональный дисбаланс организма и сердечно-сосудистые заболевания. Проведенные исследования подтверждают, что ЖДА вызывают многие факторы, но микроэлементозы являются преобладающей причиной возникновения данного заболевания. Железо (Fe) – один из важнейших биокатализаторов в организме человека, присутствует в 2 формах: Fe2+ (восстановленное) и Fe3+ (окисленное), обладает редкой способностью быть как донором, так и акцептором электронов, является системой многих белков и ферментов [4, 5]. Марганец при лигандообразовании с дрожжами позволяет увеличить биодоступность микроэлементов в комбинации при обогащении биомассы [6, 7].
Основываясь на метаболизме дрожжей – сахаромицетов (окислительно-восстановительные реакции, протекающие в них во время клеточного дыхания), удается повысить эффективность процесса обогащения дрожжей микроэлементами за счет введения в дрожжевое молоко источников различных микроэлементов, углеводов и окислителя [8]. Особенность метаболизма хлебопекарных дрожжей и двух путей одновременного энергетического обмена позволяет получать более высокие биохимические показатели по биомассе. Для четко заданного процесса производства хлебопекарных дрожжей необходимо активное аэробное культивирование с уровнем кислорода выше критической концентрации. Сигнальная наследственность дрожжевой клетки заключается в корреляции биохимических процессов и процессов метаболизма. Недостаточное содержание в культуральной среде одного из макро- и микроэлементов приводит в сжатые сроки к деградации внутриклеточных резервов и одновременно меняет генетическую модель: какая-то часть генов усиливается в действии, другая – ликвидируется. Таким образом, дрожжи рода Saccharomyces являются перспективным объектом для получения обогащенных эссенциальными микроэлементами пищевых ингредиентов и создания на их основе новых видов пищевой продукции.
Существует ряд научно обоснованных принципов обогащения макро- и микроэлементами микроорганизмов с учетом первостепенных данных, актуальных для науки, о роли конкретных нутриентов для обеспеченности населения. Первый – критерии выбора основополагающих ингредиентов; второй – обогащение микроорганизмов только для использования в ингредиентах для продуктов массового потребления; третий – обогащение не должно сказываться на безопасности конечного продукта; четвертый – обеспечение максимальной целостности обогащенных ингредиентов в процессе производства и хранения; пятый – содержание в обогащенном ингредиенте должно быть не менее 15 % от суточной потребности; шестой – количественное содержание нутриента должно быть рассчитано с учетом концентрации в сырье и ее сохранения на всем протяжении срока хранения.
Цель исследований – изучение совместимости микроэлементов для возможности сочетанного обогащения дрожжей и их ферментолизатов железом и медью.
Задачи: проведение процесса биофортификации хлебопекарных дрожжей Saccharomyces cerevisiae Y-581с железом и медью в присутствии соли марганца; установление технологических параметров получения обогащенных ферментолизатов дрожжей; исследование фракционного состава ферментолизатов дрожжей.
Объекты и методы. Объектами исследования в данной работе служили штаммы хлебопекарных дрожжей из коллекции микроорганизмов ВНИИ пищевой биотехнологии (лаборатории биотехнологии пекарных дрожжей) и соли железа, меди и марганца – источники микроэлементов.
В качестве солей – источников катионов микроэлементов использовали сульфат железа (FeSO4×7H2O), сульфат меди (CuSO4×5H2O) и сульфат марганца (МnSO4×5Н2О), квалификация чистоты – ХЧ.
Культивирование дрожжей проводили на микробиологической качалке при скорости вращения 220 об/мин в колбах Эрленмейера объемом 750 см3 с 75,0 см3 стандартной среды (солодовое сусло 8 % СВ) в течение 18 ч при температуре 30 °С.
Количественное содержание сырого протеина в биомассе определяли по методу Кьельдаля на автоматической установке Vapodest (Gerhardt, Германия) согласно ГОСТ 13496.4-2019 ГОСТ 13496.4-2019 «Корма. Комбикорма. Комбикормовое сырье. Метод определения содержания азота и сырого протеина».
Накопление биомассы определяли весовым методом после культивирования, разделяя центрифугированием твердую и жидкую фракции.
Твердую фракцию получали отделением от фильтрата на лабораторной центрифуге ОПМ-16 в течение 12 мин со скоростью вращения 8000 об/мин.
Концентрацию микроэлементов исследовали с помощью метода атомно-абсорбционной спектрометрии с электротермической атомизацией на приборе «КВАНТ-Z.ЭТА» (РФ) согласно ГОСТ Р 56372-2015 «Комбикорма, концентраты и премиксы. Определение массовой доли железа, марганца, цинка, кобальта, меди, молибдена и селена методом атомно-абсорбционной спектроскопии», а также методом инверсионной вольтамперометрии (ИВ) согласно МУ 31-17/06 (железо) и МУ 31-04/04 (медь).
Статистическую обработку новых экспериментальных данных, полученных не менее чем в 3 повторностях, осуществляли методом однофакторного дисперсионного анализа с апостериорным критерием Тьюки при р < 0,05 с использованием программы Statistica 6.0.
Результаты и их обсуждение. Поскольку известно, что все двухвалентные металлы конкурируют за возможность «закрепления» в организме, а избыток одного с высоким содержанием любого из упомянутых в таблице 1 двухвалентных металлов может блокировать его встраивание [7, 9], на первом этапе была изучена совместимость используемых микроэлементов железа и меди, для исследования способов сочетанного обогащения дрожжей. Результаты по биосовместимости микроэлементов обобщены в таблице 1.
Таблица 1
Совместимость микроэлементов для выбора сочетанного обогащения
Micronutrient compatibility for selecting combined enrichment
|
Микроэлемент |
Железо |
Магний |
Медь |
Фосфор |
Кальций |
Хром |
Марганец |
Цинк |
|
Железо |
= |
= |
+ |
= |
– |
– |
= |
– |
|
Магний |
= |
= |
= |
– |
+ |
= |
– |
= |
|
Фосфор |
= |
– |
= |
= |
– |
– |
= |
= |
|
Цинк |
– |
= |
– |
– |
– |
= |
– |
= |
|
Медь |
+ |
= |
= |
= |
= |
- |
= |
– |
|
Хром |
– |
= |
– |
– |
= |
= |
– |
+ |
|
Кальций |
– |
+ |
= |
– |
= |
= |
= |
– |
|
Марганец |
= |
= |
= |
+ |
+ |
– |
= |
– |
Примечание: «+» – оптимальное; «–» – негативное; «=» – нейтральное.
Исходя из данных таблицы 1, железо и медь имеют преимущественную совместимость, а марганец по отношению к обоим металлам нейтрален, что свидетельствует о возможности обогащения данными микроэлементами. Использование железа и меди в сочетании с марганцем позволяет повысить биодоступность микроэлементов при встраивании [7].
Проведены сравнительные исследования способов фортификации микроэлементами (железом и медью) дрожжей Saccharomyces cerevisiae 581c: 1-й способ «прижизненного» обогащения – при культивировании дрожжей; 2-й способ обогащения инактивированных клеток – после ферментативной деструкции клеточных полимеров [10–12].
Для получения фортифицированных микроэлементами (железом и медью) дрожжей на первом этапе выбран способ «прижизненного» обогащения в процессе культивирования клеток на питательных средах, в состав которых введены исследуемые микроэлементы. Добавление марганца осуществляли для исследования возможности повышения степени обогащения дрожжей микроэлементами.
Культивирование дрожжей проводили на питательных средах, содержащих соли в различных концентрациях и соотношениях: железо – 25, 50 и 100 мг%, добавляя в каждом варианте медь (2,5 и 5,0 мг%) и марганец (5,0 и 10,0 мг%). Культивирование проводили в термостатируемом качалочном аппарате в течение 18 ч при температуре 30 °С, 220 об/мин; объем питательной среды – 75,0 см3. Результаты культивирования дрожжей представлены на рисунке 1 (железо+медь без марганца) и на рисунке 2 (железо+медь+марганец).
Рис.1. Показатели сырого протеина и биомассы при культивировании дрожжей S. cerevisiae
на средах, содержащих ионы железа, меди в различных соотношениях
Crude protein and biomass indices during cultivation of S. cerevisiae yeast on media containing iron
and copper ions in different ratios
Рис. 2. Показатели сырого протеина и биомассы при культивировании дрожжей S. сerevisiae
на средах, содержащих ионы железа, меди и марганца в различных соотношениях
Indices of crude protein and biomass during cultivation of yeast S. cerevisiae on media containing iron, copper and manganese ions in different ratios
В результате культивирования при внесении в состав питательной среды 50 мг железа/100 см3, 2,5 мг меди/100 см3 и 5,0 мг марганца/100 см3 накопление биомассы увеличилось на 7,3 %, а содержание белка – на 15,5 %, что свидетельствует об активирующем действии подобранных концентраций ионов металлов на рост дрожжей и синтез белковых веществ (см. рис. 1, 2). Дальнейшее повышение содержания микроэлементов в питательных средах негативно сказалось на жизнедеятельности дрожжевых клеток.
Проведено микроскопирование дрожжей, обогащенных железом и медью в присутствии марганца. Результаты представлены на рисунке 3.
Рис. 3. Результаты микроскопирования дрожжей, обогащенных микроэлементами
Results of microscopy of yeast enriched with micronutrients
В результате микроскопирования дрожжей выявлено влияние различных дозировок микроэлементов, внесенных в питательную среду, на развитие дрожжевых клеток. Подтверждено, что подобранная концентрация солей (50 мг% железа, 2,5 мг% меди и 5,0 мг% марганца) оказывает положительное воздействие на рост и размножение дрожжей. При этом установлено, что повышение концентрации в среде меди и марганца оказывает негативное влияние на процессы генерации дрожжей: снижается количество почкующихся клеток и повышается количество мертвых (см. рис. 3).
Таким образом, установлена возможность обогащения хлебопекарных дрожжей микроэлементами железом и медью, подобранными экспериментально. Уровень железа в 100 г дрожжей составил 90,7 мг, меди – 36,3 мг.
Далее исследовали уровень обогащения дрожжей при различных дозировках микроэлементов (рис. 4, 5).
Рис. 4. Результаты обогащения дрожжей микроэлементами в процессе культивирования
на средах, содержащих 2,5 мг меди/100см3 и 5,0 мг марганца/100 см3
с различной концентрацией железа
Results of yeast micronutrient enrichment during culturing on media containing 2.5 mg copper/100cm3
and 5.0 mg manganese/100 cm3 with different iron concentrations
Рис. 5. Результаты обогащения дрожжей микроэлементами в процессе культивирования,
на средах, содержащих 5,0 мг меди/100 см3 и 10,0 мг марганца/100 см3
с различной концентрацией железа
Results of yeast enrichment with microelements in the process of cultivation on media containing 5.0 mg copper/100 cm3 and 10.0 mg manganese/100cm3 with different concentration of iron
Отмечено, что введение в питательную среду микроэлементов в дозировках 50 мг железа/100 см3, 2,5 мг меди/100 см3 и 5,0 мг марганца/100 см3 является предпочтительным для обогащения, позволяя достичь процента обогащения для железа – 90,7 %, для меди – 72,5 %, но при этом содержание марганца оказалось нулевым (см. рис. 4). Повышение концентрации марганца в среде до 10 мг%, а железа до 100 мг% негативно сказалось на степени фортификации дрожжей микроэлементами (см. рис. 5).
Проведены сравнительные исследования показателей обогащения железом и медью при культивировании дрожжей на средах, содержащих указанные ионы металлов в присутствии марганца (см. рис. 4, 5) и в отсутствие марганца (рис. 6, 7). Установлено, что наличие марганца в питательной среде с подобранной экспериментально концентрацией железа и меди способствует повышению степени встраивания железа в 1,7 раза, меди – в 2,3 раза (см. рис. 4, 6). Данный факт подтвердил способность марганца принимать участие в процессах лигандообразования и позволил повысить биодоступность микроэлементов с ним в сочетании, а комбинация с пищевыми лигандами, источником которых являются хлебопекарные дрожжи, подтверждает этот биохимический процесс.
Таким образом, изучена совместимость микроэлементов, установлена возможность смежного обогащения железом и медью в присутствии марганца и подобрана их целесообразная дозировка при культивировании дрожжей.
Ферментолиз является способом деструктурирования субклеточных структур дрожжей, при котором в мягких условиях происходит извлечение ценных нутриентов, а также снижение аллергенности [13–15]. Ферментативный гидролиз дрожжей осуществляли с применением ФП, обладающих субстратной специфичностью по отношению к белково-полисахаридным полимерам дрожжевой биомассы в 2 этапа: I – деструкция полимеров клеточной стенки под действием β-глюканаз (50,0 ед. β-ГкС/г), маннаназы (25,0 ед. МС/г) и протеаз (2,0 ед. ПС/г); II – гидролиз белков протоплазмы под действием протеаз (10,0 ед/г) [15]. После отделения жидкой фазы (растворимой части ферментолизата дрожжей) центрифугированием осуществлено осаждение белков этиловым спиртом в соотношении 1 : 3. Затем стадия центрифугирования и промывки осадка дистиллированной водой (пятикратно).
Далее проводили «встраивание» микроэлементов путем внесения растворов солей, содержащих ионы железа, меди и марганца в количестве: 50 мг железа/100 см3, 2,5 мг меди/100см3 и 5,0 мг марганца/100 см3. Обогащение проводили в условиях постоянного перемешивания при n = (200 ± 20) RPM в течение τ = 30 мин, затем центрифугировали при n = 6000 RPM и анализировали на содержание микроэлементов.
Рис. 6. Результаты обогащения дрожжей микроэлементами в процессе культивирования
на средах, содержащих 2,5 мг меди/100 см3 с различной концентрацией железа
Results of yeast enrichment with microelements during cultivation on media containing
2.5 mg copper/100 cm3 with different concentration of iron
Рис. 7. Результаты обогащения дрожжей микроэлементами в процессе культивирования
на средах, содержащих 5,0 мг меди/100 см3 с различной концентрацией железа
Results of yeast enrichment with micronutrients during cultivation on media containing
5.0 mg copper/100 cm3 with different iron concentrations
Содержание микроэлементов составило: железа – 96,5 мг в 100 г ферментолизата и меди – 41,1 мг в 100 г ферментолизата (табл. 2).
Исследовали фракционный состав ферментолизата дрожжей S. cerevisiaeY-581с. По сравнению с исходной биомассой в нем существенно сократилось содержание клетчатки, белков и высокомолекулярных пептидов; при этом повысилась концентрация аминокислот в свободной форме, низкомолекулярных пептидов и растворимых углеводов.
В результате ферментолиза обогащенной дрожжевой биомассы содержание полисахаридов сократилось в 13 раз, а растворимых углеводов и свободных аминокислот значительно увеличилось. Содержание низкомолекулярных пептидов с молекулярной массой менее 1 000 Да и аминокислот в свободной форме достигло 37,5 и 18,7 % соответственно (рис. 8).
Далее был исследован фракционный состав ферментолизата методом молекулярно-массового распределения пептидно-аминокислотных фракций (рис. 9, табл. 3).
Таблица 2
Расчет содержания микроэлементов в ферментолизате дрожжей согласно МР 2.3.1.0253-21
Calculation of trace elements content in yeast fermentolysate according to MR 2.3.1.0253-21
|
Образец |
Железо, мг/100 г |
Удовлетворение суточной потребности, г |
Медь, мг/100г |
Удовлетворение суточной потребности, г |
|
Ферментолизат дрожжей Saccharomyces cerevisiae Y-581c |
96,5 |
19,3 |
41,1 |
41,1 |
Рис. 8. Изменение биохимического состава биомассы дрожжей S. cerevisiaеY-581с в результате ферментолиза: АК ‒аминокислоты; Mr ‒ молекулярная масса
Changes in the biochemical composition of yeast S. serevisiae Y-581c biomass
as a result of fermentolysis: AК – amino acids; Mr – molecular weight
Таблица 3
Результаты хроматографического анализа биомассы и ферментолизата дрожжей
Resultsofchromatographicanalysisofyeastbiomassandfermentolysate
|
Номер образца |
Образец |
мг |
Мл H2O |
D260 |
D280 |
|
1 |
Биомасса дрожжей Saccharomyces cerevisiae, обогащенная железом и медью (4,78 мг Fe/1 г С.В. дрожжей; 0,25 мг Cu/1 г С.В. дрожжей) |
499 |
2,49 |
25,2 |
19,3 |
|
2 |
Ферментолизат дрожжей Saccharomyces cerevisiae, обогащенный железом и медью (3,05 мг Fe/1 г С.В. дрожжей; 0,06 мг Cu/1 г С.В. дрожжей) |
200 |
2,0 |
9,7 |
5,6 |
Из представленных в таблице 3 данных установлено, что при длинах волн 260 и 280 нм количество нуклеиновых кислот заметно снижается, что подтверждает факт расщепления до нуклеотидов, низкомолекулярных пептидов и аминокислот.
Рис. 9. Хроматограмма фракционного состава ферментолизата дрожжей с железом и медью.
По оси абсцисс – молекулярная масса, кДа; по оси ординат – оптическая плотность при 280 нм
Chromatogram of fractional composition of yeast fermentolysate with iron and copper.
On the abscissa, molecular weight, kDa; on the ordinate, optical density at 280 nm
В результате молекулярно-массового распределения фракций установлено, что основная часть микроэлементов распределена в области низкомолекулярных соединений ферментолизата дрожжей, что позволяет предполагать их «встраивание» в клеточную структуру и в дальнейшем исследования направить на количественное содержание микроэлемента (см. рис. 9).
На основании полученных результатов исследований разработана блок-схема получения ферментолизата дрожжей Saccharomyces cerevisiae Y-581c (рис. 10).
Рис. 10. Блок-схема получения обогащенного ферментолизата дрожжей
Saccharomyces cerevisiae Y-581c
Block diagram of preparation of enriched fermentolysate of yeast Saccharomyces cerevisiae Y-581c
Штамм дрожжей культивируют при температуре 28–30 °С в условиях ферментационной установки в течение 20 ч. Затем полученную дрожжевую биомассу подвергают 1-й стадии ферментной обработки при температуре 50 °С в течение 4 ч, затем протеолизу при температуре 35 °С в течение 12 ч. Полученный ферментолизат подвергают сепарированию с отделением жидкой фракции, а в твердую фракцию добавляют соли железа, меди и марганца в подобранной концентрации. По окончании процесса обогащения полученный ферментолизат пастеризуют при температуре 85–95 °С в течение 15–20 мин. После охлаждения до 35–37 °С его направляют на сушку. Для получения сухого ферментолизата применяют распылительные сушилки или сушильные агрегаты, снабженные циклонами. Температура теплоносителя на входе составляет 160–165 °С, на выходе – 65 °С.
Заключение. Проведены сравнительные исследования способов фортификации отобранного штамма S. cerevisiae Y-581 с, подтвердившие практическую возможность сочетанного обогащения дрожжей железом и медью: 1 – при культивировании дрожжей; 2 – ферментолизатов инактивированных клеток, с получением обогащенной продукции с различными функционально-технологическими свойствами и целевыми направлениями их применения.
Установлены рациональные дозировки внесения микроэлементов в питательные среды для культивирования отобранного штамма (50 мг железа, 2,5 мг меди и 5,0 мг марганца на 100 см3), позволяющие достичь процент встраивания: железа – 90,7 и меди – 72,5, и повышение уровня синтеза белка на 15,5 %.
Выявлена положительная динамика повышения степени обогащения микроэлементами при фортификации ферментолизатов инактивированных дрожжей и установлены рациональные условия, обеспечивающие наибольший уровень содержания микроэлементов (Fe + Cu) в целевой продукции.
Результаты фракционного состава ферментолизата дрожжей подтвердили существенное повышение содержания в биодоступной форме свободных аминокислот, низкомолекулярных пептидов и растворимых углеводов.
Разработана принципиальная блок-схема по получению ферментолизата дрожжевого с железом и медью.
1. Ayele A., Haile S.Т., Alemu D., et al. Comparative Utilization of Dead and Live Fungal Biomass for the Removal of Heavy Metal: A Concise Review // The Scientific World Journal. 2021. N 1. Р. 1–10. DOI:https://doi.org/10.1155/2021/5588111.
2. Потемина Т.Е., Волкова С.А., Кузнецова С.В., и др. Общие вопросы метаболизма железа и патогенеза железодефицитной анемии // Вестник медицинского института «Реавиз»: реабилитация, врач и здоровье. 2020. № 3. С. 125–137.
3. Igbinosa I., Berube C., Lyell D. J. Iron deficiency anemia in pregnancy // Current Opinion in Obstetrics and Gynecology. 2022. Vol. 34. P. 69–76. DOI:https://doi.org/10.1097/GCO.0000000000000772.
4. Kumar S. B., Arnipalli S.R., Mehta P., et al. Iron deficiency anemia: efficacy and limitations of nutritional and comprehensive mitigation strategies // Nutrients. 2022. Vol. 14. P. 2976. DOI: 10.3390/ nu14142976.
5. Freeland-Graves J., Kaang P., Zamora А., et al. Global diversity of dietary intakes and standards for zinc, iron, and copper // Journal of Trace Elements in Medicine and Biology. 2020. Vol. 61. P. 126515. DOI:https://doi.org/10.1016/j.jtemb.2020.126515.
6. Кадырова Р.Г., Кабиров Г.Ф., Муллахметов Р.Р. Биологические свойства и синтез комплексных солей α-аминокислот биогенных металлов. Казань, 2014. 108 с.
7. Громова О.А., Трошин И.Ю., Хаджидис А.К. Анализ молекулярных механизмов воздействия железа (II), меди, марганца в патогенезе железодефицитной анемии // Клиническая фармакология и фармаэкономика. 2010. № 1.
8. Старовойтова О.В., Садриева А.А., Мингалеева З.Ш., и др. Активация дрожжей Saccharomyces сerevisiae в технологии приготовлении хлеба // Вестник Казанского технологического университета. 2014. № 5. С. 235–237.
9. Ших Е.В. Взаимодействия компонентов витаминно-минеральных комплексов и рациональная витаминотерапия // Российский медицинский журнал. 2004. № 17. С. 1011.
10. Соколова Е.Н., Волкова Г.С., Фурсова Н.А., и др. Дрожжевая биомасса-потенциальная модель для обогащения микроэлементами методами биотехнологии // Пищевая промышленность. 2024. № 6. С. 41–44.
11. Юраскина Т.В., Соколова Е.Н., Фурсова Н.А., и др. Инновационный подход к обогащению пищевых продуктов с применением хлебопекарных дрожжей // Пищевые системы. 2023. Т. 6, № 4. С. 554–560. DOI:https://doi.org/10.21323/2618-9771-2023-6-4-554-560.
12. Соколова Е.Н., Серба Е.М., Фурсова Н.А., и др. Биотехнологические возможности обогащения дрожжевой биомассы // АПК России. 2023. Т. 30, № 5. С. 696–702. DOI:https://doi.org/10.55934/2587-8824-2023-30-5-696-702.
13. Серба Е.М., Юраскина Т.В., Римарева Л.В., и др. Микробная биомасса – биоресурс для получения функциональных пищевых ингредиентов (обзор) // Техника и технология пищевых производств. 2023. Т. 53. № 3. С. 426–444. DOI:https://doi.org/10.21603/2074-9414-2023-3-2446.
14. Ревякина В.А., Серба Е.М., Кувшинова Е.Д., и др. Влияние ферментолизата непатогенных (пивных) дрожжей (Протамина К) на показатели физического развития массы тела и роста больных пищевой аллергией // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2022. Т. 67, № 4. С. 220. DOI:https://doi.org/10.21508/1027–4065-congress-2022.
15. Серба Е.М., Юраскина Т.В., Римарева Л.В., и др. Ферментолизат Saccharomycescerevisiae: научно-практическое обоснование использования в качестве биологически активной добавки // Биотехнология. 2022. Т. 38, № 4. С. 107–113. DOI:https://doi.org/10.56304/S0234275822040123.
