employee from 01.01.1992 to 01.01.2025
Moscow, Russian Federation
employee from 01.01.1996 to 01.01.2025
VNII pischevoy biotehnologii (laboratory manager)
from 01.01.2003 to 01.01.2025
Moscow, Russian Federation
from 01.01.1996 to 01.01.2025
VAK Russia 1.5
VAK Russia 4.1.1
VAK Russia 4.1.2
VAK Russia 4.1.3
VAK Russia 4.1.4
VAK Russia 4.1.5
VAK Russia 4.2.1
VAK Russia 4.2.2
VAK Russia 4.2.3
VAK Russia 4.2.4
VAK Russia 4.2.5
VAK Russia 4.3.3
VAK Russia 4.3.5
UDC 663.12
The aim of the study is to investigate the compatibility of trace elements for the possibility of combined enrichment of yeast with iron and copper. The objects of the study were a strain of baker's yeast from the collection of microorganisms of the All-Russian Research Institute of Food Biotechnology, Laboratory of Baker's Yeast Biotechnology, and salts of iron, copper and manganese - sources of trace elements. Yeast was cultured on a microbiological shaker at a rotation speed of 220 rpm in 750 cm3 Erlenmeyer flasks with 75.0 cm3 of a standard medium with a dry matter content of 8 % for 18 hours at a temperature of 30 °C. The quantitative content of nitrogenous substances in yeast biomass was determined by the Kjeldahl method according to GOST 13496.4-2019. Biomass accumulation was studied by the weight control method after cultivation, separating the solid and liquid fractions by centrifugation. Separation of biomass into solid and liquid fractions was carried out on a laboratory centrifuge OPM-16 for 12 minutes at a rotation speed of 8000 rpm. Microelement composition (iron and copper) was determined by atomic absorption spectrometry with electrothermal atomization on a KVANT-Z.ETA device. Comparative studies of the methods of fortification of the selected strain S. cerevisiae Y-581 c were carried out, confirming the practical possibility of combined enrichment of yeast with iron and copper: 1 – during yeast cultivation; 2 – enzymatic lysates of inactivated cells, with obtaining enriched products with various functional and technological properties and target areas of their application. Rational dosages of microelements in nutrient media for culturing the selected strain (50 mg iron, 2.5 mg copper and 5.0 mg manganese per 100 cm3) were established, allowing to achieve the percentage of iron incorporation (90.7 %) and copper (72.5 %) and an increase in the level of protein synthesis by 15.5 %. Positive dynamics of increasing the degree of enrichment with microelements during fortification of enzymatic lysates of inactivated yeast was revealed and rational conditions were established that provide the highest level of microelement content (Fe + Cu) in the target product. The results of the fractional composition of the yeast fermentolysate confirmed a significant increase in the content of free amino acids, low-molecular peptides and soluble carbohydrates in bioavailable form. A basic block diagram for obtaining yeast fermentolysate with iron and copper has been developed.
enrichment, micronutrients, compatibility, ingredient, ligand, fermentolysate
Введение. В настоящее время железодефицитная анемия (ЖДА) – самое распространенное заболевание в мире среди женского населения. По данным Всемирной организации здравоохранения, более 2,5 млрд человек имеют скрытый дефицит железа. В Российской Федерации около 50 % населения испытывают недостаток железа, а также меди [1–4]. Это связано с негативной экологической ситуацией, сложившейся в ряде российских регионов, нервными перегрузками и влечет за собой нарушения системы питания, гормональный дисбаланс организма и сердечно-сосудистые заболевания. Проведенные исследования подтверждают, что ЖДА вызывают многие факторы, но микроэлементозы являются преобладающей причиной возникновения данного заболевания. Железо (Fe) – один из важнейших биокатализаторов в организме человека, присутствует в 2 формах: Fe2+ (восстановленное) и Fe3+ (окисленное), обладает редкой способностью быть как донором, так и акцептором электронов, является системой многих белков и ферментов [4, 5]. Марганец при лигандообразовании с дрожжами позволяет увеличить биодоступность микроэлементов в комбинации при обогащении биомассы [6, 7].
Основываясь на метаболизме дрожжей – сахаромицетов (окислительно-восстановительные реакции, протекающие в них во время клеточного дыхания), удается повысить эффективность процесса обогащения дрожжей микроэлементами за счет введения в дрожжевое молоко источников различных микроэлементов, углеводов и окислителя [8]. Особенность метаболизма хлебопекарных дрожжей и двух путей одновременного энергетического обмена позволяет получать более высокие биохимические показатели по биомассе. Для четко заданного процесса производства хлебопекарных дрожжей необходимо активное аэробное культивирование с уровнем кислорода выше критической концентрации. Сигнальная наследственность дрожжевой клетки заключается в корреляции биохимических процессов и процессов метаболизма. Недостаточное содержание в культуральной среде одного из макро- и микроэлементов приводит в сжатые сроки к деградации внутриклеточных резервов и одновременно меняет генетическую модель: какая-то часть генов усиливается в действии, другая – ликвидируется. Таким образом, дрожжи рода Saccharomyces являются перспективным объектом для получения обогащенных эссенциальными микроэлементами пищевых ингредиентов и создания на их основе новых видов пищевой продукции.
Существует ряд научно обоснованных принципов обогащения макро- и микроэлементами микроорганизмов с учетом первостепенных данных, актуальных для науки, о роли конкретных нутриентов для обеспеченности населения. Первый – критерии выбора основополагающих ингредиентов; второй – обогащение микроорганизмов только для использования в ингредиентах для продуктов массового потребления; третий – обогащение не должно сказываться на безопасности конечного продукта; четвертый – обеспечение максимальной целостности обогащенных ингредиентов в процессе производства и хранения; пятый – содержание в обогащенном ингредиенте должно быть не менее 15 % от суточной потребности; шестой – количественное содержание нутриента должно быть рассчитано с учетом концентрации в сырье и ее сохранения на всем протяжении срока хранения.
Цель исследований – изучение совместимости микроэлементов для возможности сочетанного обогащения дрожжей и их ферментолизатов железом и медью.
Задачи: проведение процесса биофортификации хлебопекарных дрожжей Saccharomyces cerevisiae Y-581с железом и медью в присутствии соли марганца; установление технологических параметров получения обогащенных ферментолизатов дрожжей; исследование фракционного состава ферментолизатов дрожжей.
Объекты и методы. Объектами исследования в данной работе служили штаммы хлебопекарных дрожжей из коллекции микроорганизмов ВНИИ пищевой биотехнологии (лаборатории биотехнологии пекарных дрожжей) и соли железа, меди и марганца – источники микроэлементов.
В качестве солей – источников катионов микроэлементов использовали сульфат железа (FeSO4×7H2O), сульфат меди (CuSO4×5H2O) и сульфат марганца (МnSO4×5Н2О), квалификация чистоты – ХЧ.
Культивирование дрожжей проводили на микробиологической качалке при скорости вращения 220 об/мин в колбах Эрленмейера объемом 750 см3 с 75,0 см3 стандартной среды (солодовое сусло 8 % СВ) в течение 18 ч при температуре 30 °С.
Количественное содержание сырого протеина в биомассе определяли по методу Кьельдаля на автоматической установке Vapodest (Gerhardt, Германия) согласно ГОСТ 13496.4-2019 ГОСТ 13496.4-2019 «Корма. Комбикорма. Комбикормовое сырье. Метод определения содержания азота и сырого протеина».
Накопление биомассы определяли весовым методом после культивирования, разделяя центрифугированием твердую и жидкую фракции.
Твердую фракцию получали отделением от фильтрата на лабораторной центрифуге ОПМ-16 в течение 12 мин со скоростью вращения 8000 об/мин.
Концентрацию микроэлементов исследовали с помощью метода атомно-абсорбционной спектрометрии с электротермической атомизацией на приборе «КВАНТ-Z.ЭТА» (РФ) согласно ГОСТ Р 56372-2015 «Комбикорма, концентраты и премиксы. Определение массовой доли железа, марганца, цинка, кобальта, меди, молибдена и селена методом атомно-абсорбционной спектроскопии», а также методом инверсионной вольтамперометрии (ИВ) согласно МУ 31-17/06 (железо) и МУ 31-04/04 (медь).
Статистическую обработку новых экспериментальных данных, полученных не менее чем в 3 повторностях, осуществляли методом однофакторного дисперсионного анализа с апостериорным критерием Тьюки при р < 0,05 с использованием программы Statistica 6.0.
Результаты и их обсуждение. Поскольку известно, что все двухвалентные металлы конкурируют за возможность «закрепления» в организме, а избыток одного с высоким содержанием любого из упомянутых в таблице 1 двухвалентных металлов может блокировать его встраивание [7, 9], на первом этапе была изучена совместимость используемых микроэлементов железа и меди, для исследования способов сочетанного обогащения дрожжей. Результаты по биосовместимости микроэлементов обобщены в таблице 1.
Таблица 1
Совместимость микроэлементов для выбора сочетанного обогащения
Micronutrient compatibility for selecting combined enrichment
|
Микроэлемент |
Железо |
Магний |
Медь |
Фосфор |
Кальций |
Хром |
Марганец |
Цинк |
|
Железо |
= |
= |
+ |
= |
– |
– |
= |
– |
|
Магний |
= |
= |
= |
– |
+ |
= |
– |
= |
|
Фосфор |
= |
– |
= |
= |
– |
– |
= |
= |
|
Цинк |
– |
= |
– |
– |
– |
= |
– |
= |
|
Медь |
+ |
= |
= |
= |
= |
- |
= |
– |
|
Хром |
– |
= |
– |
– |
= |
= |
– |
+ |
|
Кальций |
– |
+ |
= |
– |
= |
= |
= |
– |
|
Марганец |
= |
= |
= |
+ |
+ |
– |
= |
– |
Примечание: «+» – оптимальное; «–» – негативное; «=» – нейтральное.
Исходя из данных таблицы 1, железо и медь имеют преимущественную совместимость, а марганец по отношению к обоим металлам нейтрален, что свидетельствует о возможности обогащения данными микроэлементами. Использование железа и меди в сочетании с марганцем позволяет повысить биодоступность микроэлементов при встраивании [7].
Проведены сравнительные исследования способов фортификации микроэлементами (железом и медью) дрожжей Saccharomyces cerevisiae 581c: 1-й способ «прижизненного» обогащения – при культивировании дрожжей; 2-й способ обогащения инактивированных клеток – после ферментативной деструкции клеточных полимеров [10–12].
Для получения фортифицированных микроэлементами (железом и медью) дрожжей на первом этапе выбран способ «прижизненного» обогащения в процессе культивирования клеток на питательных средах, в состав которых введены исследуемые микроэлементы. Добавление марганца осуществляли для исследования возможности повышения степени обогащения дрожжей микроэлементами.
Культивирование дрожжей проводили на питательных средах, содержащих соли в различных концентрациях и соотношениях: железо – 25, 50 и 100 мг%, добавляя в каждом варианте медь (2,5 и 5,0 мг%) и марганец (5,0 и 10,0 мг%). Культивирование проводили в термостатируемом качалочном аппарате в течение 18 ч при температуре 30 °С, 220 об/мин; объем питательной среды – 75,0 см3. Результаты культивирования дрожжей представлены на рисунке 1 (железо+медь без марганца) и на рисунке 2 (железо+медь+марганец).
Рис.1. Показатели сырого протеина и биомассы при культивировании дрожжей S. cerevisiae
на средах, содержащих ионы железа, меди в различных соотношениях
Crude protein and biomass indices during cultivation of S. cerevisiae yeast on media containing iron
and copper ions in different ratios
Рис. 2. Показатели сырого протеина и биомассы при культивировании дрожжей S. сerevisiae
на средах, содержащих ионы железа, меди и марганца в различных соотношениях
Indices of crude protein and biomass during cultivation of yeast S. cerevisiae on media containing iron, copper and manganese ions in different ratios
В результате культивирования при внесении в состав питательной среды 50 мг железа/100 см3, 2,5 мг меди/100 см3 и 5,0 мг марганца/100 см3 накопление биомассы увеличилось на 7,3 %, а содержание белка – на 15,5 %, что свидетельствует об активирующем действии подобранных концентраций ионов металлов на рост дрожжей и синтез белковых веществ (см. рис. 1, 2). Дальнейшее повышение содержания микроэлементов в питательных средах негативно сказалось на жизнедеятельности дрожжевых клеток.
Проведено микроскопирование дрожжей, обогащенных железом и медью в присутствии марганца. Результаты представлены на рисунке 3.
Рис. 3. Результаты микроскопирования дрожжей, обогащенных микроэлементами
Results of microscopy of yeast enriched with micronutrients
В результате микроскопирования дрожжей выявлено влияние различных дозировок микроэлементов, внесенных в питательную среду, на развитие дрожжевых клеток. Подтверждено, что подобранная концентрация солей (50 мг% железа, 2,5 мг% меди и 5,0 мг% марганца) оказывает положительное воздействие на рост и размножение дрожжей. При этом установлено, что повышение концентрации в среде меди и марганца оказывает негативное влияние на процессы генерации дрожжей: снижается количество почкующихся клеток и повышается количество мертвых (см. рис. 3).
Таким образом, установлена возможность обогащения хлебопекарных дрожжей микроэлементами железом и медью, подобранными экспериментально. Уровень железа в 100 г дрожжей составил 90,7 мг, меди – 36,3 мг.
Далее исследовали уровень обогащения дрожжей при различных дозировках микроэлементов (рис. 4, 5).
Рис. 4. Результаты обогащения дрожжей микроэлементами в процессе культивирования
на средах, содержащих 2,5 мг меди/100см3 и 5,0 мг марганца/100 см3
с различной концентрацией железа
Results of yeast micronutrient enrichment during culturing on media containing 2.5 mg copper/100cm3
and 5.0 mg manganese/100 cm3 with different iron concentrations
Рис. 5. Результаты обогащения дрожжей микроэлементами в процессе культивирования,
на средах, содержащих 5,0 мг меди/100 см3 и 10,0 мг марганца/100 см3
с различной концентрацией железа
Results of yeast enrichment with microelements in the process of cultivation on media containing 5.0 mg copper/100 cm3 and 10.0 mg manganese/100cm3 with different concentration of iron
Отмечено, что введение в питательную среду микроэлементов в дозировках 50 мг железа/100 см3, 2,5 мг меди/100 см3 и 5,0 мг марганца/100 см3 является предпочтительным для обогащения, позволяя достичь процента обогащения для железа – 90,7 %, для меди – 72,5 %, но при этом содержание марганца оказалось нулевым (см. рис. 4). Повышение концентрации марганца в среде до 10 мг%, а железа до 100 мг% негативно сказалось на степени фортификации дрожжей микроэлементами (см. рис. 5).
Проведены сравнительные исследования показателей обогащения железом и медью при культивировании дрожжей на средах, содержащих указанные ионы металлов в присутствии марганца (см. рис. 4, 5) и в отсутствие марганца (рис. 6, 7). Установлено, что наличие марганца в питательной среде с подобранной экспериментально концентрацией железа и меди способствует повышению степени встраивания железа в 1,7 раза, меди – в 2,3 раза (см. рис. 4, 6). Данный факт подтвердил способность марганца принимать участие в процессах лигандообразования и позволил повысить биодоступность микроэлементов с ним в сочетании, а комбинация с пищевыми лигандами, источником которых являются хлебопекарные дрожжи, подтверждает этот биохимический процесс.
Таким образом, изучена совместимость микроэлементов, установлена возможность смежного обогащения железом и медью в присутствии марганца и подобрана их целесообразная дозировка при культивировании дрожжей.
Ферментолиз является способом деструктурирования субклеточных структур дрожжей, при котором в мягких условиях происходит извлечение ценных нутриентов, а также снижение аллергенности [13–15]. Ферментативный гидролиз дрожжей осуществляли с применением ФП, обладающих субстратной специфичностью по отношению к белково-полисахаридным полимерам дрожжевой биомассы в 2 этапа: I – деструкция полимеров клеточной стенки под действием β-глюканаз (50,0 ед. β-ГкС/г), маннаназы (25,0 ед. МС/г) и протеаз (2,0 ед. ПС/г); II – гидролиз белков протоплазмы под действием протеаз (10,0 ед/г) [15]. После отделения жидкой фазы (растворимой части ферментолизата дрожжей) центрифугированием осуществлено осаждение белков этиловым спиртом в соотношении 1 : 3. Затем стадия центрифугирования и промывки осадка дистиллированной водой (пятикратно).
Далее проводили «встраивание» микроэлементов путем внесения растворов солей, содержащих ионы железа, меди и марганца в количестве: 50 мг железа/100 см3, 2,5 мг меди/100см3 и 5,0 мг марганца/100 см3. Обогащение проводили в условиях постоянного перемешивания при n = (200 ± 20) RPM в течение τ = 30 мин, затем центрифугировали при n = 6000 RPM и анализировали на содержание микроэлементов.
Рис. 6. Результаты обогащения дрожжей микроэлементами в процессе культивирования
на средах, содержащих 2,5 мг меди/100 см3 с различной концентрацией железа
Results of yeast enrichment with microelements during cultivation on media containing
2.5 mg copper/100 cm3 with different concentration of iron
Рис. 7. Результаты обогащения дрожжей микроэлементами в процессе культивирования
на средах, содержащих 5,0 мг меди/100 см3 с различной концентрацией железа
Results of yeast enrichment with micronutrients during cultivation on media containing
5.0 mg copper/100 cm3 with different iron concentrations
Содержание микроэлементов составило: железа – 96,5 мг в 100 г ферментолизата и меди – 41,1 мг в 100 г ферментолизата (табл. 2).
Исследовали фракционный состав ферментолизата дрожжей S. cerevisiaeY-581с. По сравнению с исходной биомассой в нем существенно сократилось содержание клетчатки, белков и высокомолекулярных пептидов; при этом повысилась концентрация аминокислот в свободной форме, низкомолекулярных пептидов и растворимых углеводов.
В результате ферментолиза обогащенной дрожжевой биомассы содержание полисахаридов сократилось в 13 раз, а растворимых углеводов и свободных аминокислот значительно увеличилось. Содержание низкомолекулярных пептидов с молекулярной массой менее 1 000 Да и аминокислот в свободной форме достигло 37,5 и 18,7 % соответственно (рис. 8).
Далее был исследован фракционный состав ферментолизата методом молекулярно-массового распределения пептидно-аминокислотных фракций (рис. 9, табл. 3).
Таблица 2
Расчет содержания микроэлементов в ферментолизате дрожжей согласно МР 2.3.1.0253-21
Calculation of trace elements content in yeast fermentolysate according to MR 2.3.1.0253-21
|
Образец |
Железо, мг/100 г |
Удовлетворение суточной потребности, г |
Медь, мг/100г |
Удовлетворение суточной потребности, г |
|
Ферментолизат дрожжей Saccharomyces cerevisiae Y-581c |
96,5 |
19,3 |
41,1 |
41,1 |
Рис. 8. Изменение биохимического состава биомассы дрожжей S. cerevisiaеY-581с в результате ферментолиза: АК ‒аминокислоты; Mr ‒ молекулярная масса
Changes in the biochemical composition of yeast S. serevisiae Y-581c biomass
as a result of fermentolysis: AК – amino acids; Mr – molecular weight
Таблица 3
Результаты хроматографического анализа биомассы и ферментолизата дрожжей
Resultsofchromatographicanalysisofyeastbiomassandfermentolysate
|
Номер образца |
Образец |
мг |
Мл H2O |
D260 |
D280 |
|
1 |
Биомасса дрожжей Saccharomyces cerevisiae, обогащенная железом и медью (4,78 мг Fe/1 г С.В. дрожжей; 0,25 мг Cu/1 г С.В. дрожжей) |
499 |
2,49 |
25,2 |
19,3 |
|
2 |
Ферментолизат дрожжей Saccharomyces cerevisiae, обогащенный железом и медью (3,05 мг Fe/1 г С.В. дрожжей; 0,06 мг Cu/1 г С.В. дрожжей) |
200 |
2,0 |
9,7 |
5,6 |
Из представленных в таблице 3 данных установлено, что при длинах волн 260 и 280 нм количество нуклеиновых кислот заметно снижается, что подтверждает факт расщепления до нуклеотидов, низкомолекулярных пептидов и аминокислот.
Рис. 9. Хроматограмма фракционного состава ферментолизата дрожжей с железом и медью.
По оси абсцисс – молекулярная масса, кДа; по оси ординат – оптическая плотность при 280 нм
Chromatogram of fractional composition of yeast fermentolysate with iron and copper.
On the abscissa, molecular weight, kDa; on the ordinate, optical density at 280 nm
В результате молекулярно-массового распределения фракций установлено, что основная часть микроэлементов распределена в области низкомолекулярных соединений ферментолизата дрожжей, что позволяет предполагать их «встраивание» в клеточную структуру и в дальнейшем исследования направить на количественное содержание микроэлемента (см. рис. 9).
На основании полученных результатов исследований разработана блок-схема получения ферментолизата дрожжей Saccharomyces cerevisiae Y-581c (рис. 10).
Рис. 10. Блок-схема получения обогащенного ферментолизата дрожжей
Saccharomyces cerevisiae Y-581c
Block diagram of preparation of enriched fermentolysate of yeast Saccharomyces cerevisiae Y-581c
Штамм дрожжей культивируют при температуре 28–30 °С в условиях ферментационной установки в течение 20 ч. Затем полученную дрожжевую биомассу подвергают 1-й стадии ферментной обработки при температуре 50 °С в течение 4 ч, затем протеолизу при температуре 35 °С в течение 12 ч. Полученный ферментолизат подвергают сепарированию с отделением жидкой фракции, а в твердую фракцию добавляют соли железа, меди и марганца в подобранной концентрации. По окончании процесса обогащения полученный ферментолизат пастеризуют при температуре 85–95 °С в течение 15–20 мин. После охлаждения до 35–37 °С его направляют на сушку. Для получения сухого ферментолизата применяют распылительные сушилки или сушильные агрегаты, снабженные циклонами. Температура теплоносителя на входе составляет 160–165 °С, на выходе – 65 °С.
Заключение. Проведены сравнительные исследования способов фортификации отобранного штамма S. cerevisiae Y-581 с, подтвердившие практическую возможность сочетанного обогащения дрожжей железом и медью: 1 – при культивировании дрожжей; 2 – ферментолизатов инактивированных клеток, с получением обогащенной продукции с различными функционально-технологическими свойствами и целевыми направлениями их применения.
Установлены рациональные дозировки внесения микроэлементов в питательные среды для культивирования отобранного штамма (50 мг железа, 2,5 мг меди и 5,0 мг марганца на 100 см3), позволяющие достичь процент встраивания: железа – 90,7 и меди – 72,5, и повышение уровня синтеза белка на 15,5 %.
Выявлена положительная динамика повышения степени обогащения микроэлементами при фортификации ферментолизатов инактивированных дрожжей и установлены рациональные условия, обеспечивающие наибольший уровень содержания микроэлементов (Fe + Cu) в целевой продукции.
Результаты фракционного состава ферментолизата дрожжей подтвердили существенное повышение содержания в биодоступной форме свободных аминокислот, низкомолекулярных пептидов и растворимых углеводов.
Разработана принципиальная блок-схема по получению ферментолизата дрожжевого с железом и медью.
1. Ayele A, Haile ST, Alemu D, et al. Comparative Utilization of Dead and Live Fungal Biomass for the Removal of Heavy Metal: A Concise Review. The Scientific World Journal. 2021;1:1-10. DOI:https://doi.org/10.1155/2021/5588111.
2. Potemina TE, Volkova SA, Kuznetsova SV, et al. General issues of iron metabolism and pathogenesis of iron deficiency anaemia. Bulletin of the Medical Institute ‘Reaviz’: rehabilitation, doctor and health. 2020;3:125-137.
3. Igbinosa I, Berube C, Lyell DJ. Iron deficiency anemia in pregnancy. Current Opinion in Obstetrics and Gynecology. 2022;34:69-76. DOI:https://doi.org/10.1097/GCO.0000000000000772.
4. Kumar SB, Arnipalli SR, Mehta P, et al. Iron deficiency anemia: efficacy and limitations of nutritional and comprehensive mitigation strategies. Nutrients. 2022;14:2976. DOI:https://doi.org/10.3390/nu14142976.
5. Freeland-Graves J, Kaang P, Zamora A, et al. Global diversity of dietary intakes and standards for zinc, iron, and copper. Journal of Trace Elements in Medicine and Biology. 2020;61:126515. DOI:https://doi.org/10.1016/j.jtemb.2020.126515.
6. Kadyrova RG, Kabirov GF, Mullakhmetov RR. Biological properties and synthesis of complex salts of α-amino acids of biogenic metals. Kazan; 2014. 108 p.
7. Gromova OA, Troshin IYu, Hadjidis AK. Analysis of molecular mechanisms of iron (II), copper, manganese in the pathogenesis of iron deficiency anaemia. Clinical Pharmacology and Pharmacoeconomics. 2010. № 1. URL: https://medi.ru/info/5757.
8. Starovoitova OV, Sadrieva AA, Mingaleeva ZSh, et al. Activation of yeast Saccharomyces serevisiae in the technology of bread preparation. Bulletin of Kazan Technological University. 2014;5:235-237.
9. Shikh EV. Interactions of components of vitamin-mineral complexes and rational vitamin therapy. Russian Medical Journal. 2004;17:1011.
10. Sokolova EN, Volkova GS, Fursova NA, et al. Yeast biomass-potential model for enrichment of trace elements by biotechnology methods. Food Industry.2024;6:41-44.
11. Yuraskina TV, Sokolova EN, Fursova NA, et al. Innovative approach to the enrichment of food products using baker's yeast. Food Systems. 2023;6(4):554-560. DOI:https://doi.org/10.21323/2618-9771-2023-6-4-554-560.
12. Sokolova EN, Serba EM, Fursova NA, et al. Biotechnological opportunities for enrichment of yeast biomass. APK Russia. 2023;30(5):696-702. DOI:https://doi.org/10.55934/2587-8824-2023-30-5-696-702.
13. Serba EM, Yuraskina TV, Rimareva LV, et al. Microbial biomass – bioresource for obtaining functional food ingredients (review). Technique and technology of food production. 2023;53(3):426-444. DOI:https://doi.org/10.21603/2074-9414-2023-3-2446.
14. Revyakina VA, Serba EM, Kuvshinova ED, et al. Effect of fermentolysate of non-pathogenic (brewer's) yeast (Protamine K) on physical development indicators of body weight and growth of food allergy patients. Russian journal of perinatology and paediatrics. 2022;67(4):220. DOI:https://doi.org/10.21508/1027–4065-congress-2022.
15. Serba EM, Yuraskina TV, Rimareva LV, et al. Fermentolysate Saccharomyces cerevisiae: scientific and practical justification for use as a biologically active additive. Biotechnology. 2022;38(4):107-113. DOI:https://doi.org/10.56304/S0234275822040123.
